ELISA检测

ELISA(酶联接免疫吸附反应分析)是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的实验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。
钟鼎生物携手武汉知名外贸ELISA试剂盒品牌，推出2万余种ELISA检测试剂盒，凡在钟鼎生物购买试剂盒的客户，可享受免费的ELISA检测服务。

ELISA检测技术服务报价

ELISA检测技术服务
服务编号	服务项目	周期	报价
BA402	ELISA检测技术服务	1-2周	650元/板

服务提示
1、如果间接法用于检测抗体，客户须提供足量一抗（或由我公司代为购买），同时请提供商业抗体的详细说明书，便于我们按照说明书要求精确实验。
2、如果选择使用双抗体夹心法用于检测抗，客户须提供足量抗原。对抗原的纯度及质量要求将依据实验要求进行商讨后决定。
3、客户无需提供二抗，为了保证试验顺利准确，客户提供的抗体、抗原信息务必准确详细，我们的工作人员会按照Elisa标准的SOP流程操作。

实验方法及步骤
在实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。目前我们对客户提供比较常用的ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法服务。

Elisa检测实验步骤
双抗体夹心法(检测未知抗原)	间接法(检测未知抗体)
1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次。 ↓ 2、加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。 ↓ 3、加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。 ↓ 4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。 ↓ 5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。 ↓ 6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。	1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml， 每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。 ↓ 2、加样：加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照) ↓ 3、加酶标抗体：于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml，37℃孵育30-60分钟，洗涤,最后一遍用DDW洗涤。 ↓ 4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。 ↓ 5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。 ↓ 6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

ELISA技术服务流程
1、如有任何需要，通过电话、邮件、传真或业务人员等多种方式联系我们，我公司技术支持人员将会与您及时沟通，确认订单，并协商实验方案。签订定制协议后，支付总价的50%作为预付款。
2、按照实验要求提供必要的抗体和抗原，常规认为，普通商业抗体均满足ELISA实验要求；客户提供抗原合抗体的同时，请提供阴性对照，以确保实验的严谨和准确。
3、实验进行阶段，我公司技术支持人员会及时向您汇报实验进度。
4、实验结束，依据所签订的合同，返还剩余的实验材料，并向您发送检测报告，同时请您支付剩余的50%货款。

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