哺乳动物细胞系统蛋白表达是广为应用的人类复杂糖基化蛋白的表达系统，也是活性蛋白因子及各类受体蛋白的优异表达系统，在蛋白表达过程中会形成接近天然蛋白的蛋白质折叠和聚合，具备活性蛋白所必须的空间结构和修饰，60%以上的的药用蛋白产品由哺乳动物细胞表达系统获得。在科研领域，为了获得有活性的重组蛋白，哺乳动物细胞表达系统是更好方案。
钟鼎 ZoonMam™ 哺乳动物细胞蛋白表达服务特色
哺乳动物体系有很多的先天优势，获得天然修饰蛋白的概率大大增加，钟鼎生物的 ZoonMam™ 哺乳动物蛋白表达体系配套的cDNA文库、蛋白设计分析服务，以及表达方案，有助于提高蛋白表达的成功率和产量。
如果您需要mg级别的小量蛋白，我们推荐使用pAZ-V5体系瞬转HEK293细胞；如果需要 构建稳定表达的细胞株，推荐使用pAZ-V5体系瞬转CHO细胞后通过G418筛选高表达的稳定细胞株。
| 哺乳动物细胞表达步骤及交付标准 | |||
|---|---|---|---|
| 1、表达体系系统选择 | |||
| 可选表达载体 pAZ-V5相关系列载体(分泌型、可选His-tag） 其他商业化的载体 |
可选表达宿主 HEK293系列细胞 CHO系列细胞 （根据不同要求，我们会选择贴壁型或悬浮型的细胞完成实验） 其他商业菌株 |
||
| 2、表达载体构建 | 周期 | 交付数据及材料 | 报价 |
|
A.基因优化及基因合成 B.亚克隆至真核表达载体中 C.无内毒素质粒抽提 |
基因合成 2周左右 亚克隆 1-2周 |
1、基因合成报告 2、测序验证报告 3、包含表达质粒的大肠杆菌DH10 4、表达质粒 |
哺乳动物细胞蛋白表达服务属于科研型服务项目，为了给您提供更专业、细致的服务支持
请拨打免费电话 400-066-8086 |
| 3、瞬时转染小试 | |||
|
D.细胞瞬时转染 E.表达小试 F.表达分析鉴定（WB） |
细胞转染 1周 表达鉴定 1-2周 |
表达分析报告 | |
| 4、表达及纯化 | |||
|
G.扩大 H.Ni柱亲和纯化 I.重组蛋白鉴定检测 |
表达纯化检测 1-2周 |
蛋白样品 （以实际得率为准） | |
| 5、放大培养及蛋白纯化 | |||
|
J.放大培养（根据具体需求量） K.Ni柱亲和纯化 L.纯度鉴定（PAGE） M.蛋白分装发货 |
放大培养 2-3周 表达纯化 1-2周 |
1、蛋白纯度鉴定报告 2、成品蛋白 (具体量依据小试表达水平拟定） |
|
补充说明
1、不同的蛋白表达量差异很大，我们在小试阶段会交付尽可能多的目的重组蛋白。
2、正常情况下，我们使用Mouse-Anti-His抗体检测重组蛋白，如果选择不带标签，请提供特异性的抗体用于WB检测。
3、如果选择不携带任何标签，我们可以使用AKATA蛋白纯化设备分离目的蛋白，但是纯化费用会增加。
4、即使蛋白不表达或表达量极低，我们无法获得目的蛋白，我们也会提供全套的实验流程和原始照片。
部分客户署名公司发表文章：
1.SARS-CoV-2 envelope protein impairs airway epithelial barrier function and exacerbates airway inflammation via increased intracellular Cl− concentration.Signal Transduction and Targeted Therapy (2024) 9:74(IF=40.8)
2.Malaria oocysts require circumsporozoite protein to evade mosquito immunity.NATURE COMMUNICATIONS | (2022) 13:3208(IF=14.7)
3.Identification and functional characterization of a novel BEL1-LIKE homeobox transcription factor GmBLH4 in soybean.https://doi.org/10.1007/s11240-018-1419-4(IF=12.085)
4.Nanopore efficiently identifies hepatitis D virus antigens in vitro assay.Materials Today Physics 46 (2024) 101479(IF=10)
4.Integration of genome wide association studies and coexpression networks reveal roles of PtoWRKY 42-PtoUGT76C1-1 in trans-zeatin metabolism and cytokinin sensitivity in poplar.New Phytologist (2021) 231: 1462–1477doi: 10.1111/nph.1746(IF=9.4)
5.Targeting HLA-F suppresses the proliferation of glioma cells via a reduction in hexokinase 2-dependent glycolysis.International Journal of Biological Sciences.Published: 2021.03.25.doi:10.7150/ijbs.56357(IF=9.2)
6.Discovery of Clinical Candidate (5-(3-(4-Chlorophenoxy)prop-1-yn-1-yl)-3-hydroxypicolinoyl)glycine, an Orally Bioavailable Prolyl Hydroxylase Inhibitor for the Treatment of Anemia.2020, 63, 17, 10045–10060(IF=7.3)
7.Adenosine Monophosphate-Activated Protein Kinase (AMPK) Phosphorylation Is Required for 20-Hydroxyecdysone Regulates Ecdysis in Apolygus lucorum.Int J Mol Sci. 2023 May 11;24(10):8587. doi: 10.3390/ijms24108587.(IF=6.2)
8.The major-effect quantitative trait locus CsARN6.1 encodes an AAA ATPase domain-containing protein that is associated with waterlogging stress tolerance by promoting adventitious root formation.2018 Mar;93(5):917-930. doi: 10.1111/tpj.13819. Epub 2018 Feb 2.(IF=7.1)
相关服务
猜您想看：