酵母表达系统是工业微生物中应用较广泛的系统，兼有了原核表达的周期短、成本低廉、易操作等优点，易于工业级别放大培养；同时具备了真核细胞对蛋白的空间折叠，糖基化修饰等能力，使得蛋白可溶性大幅度提高，为研究蛋白的生理活性提供了强有力的工具。
生命科学进入后基因组时代，在许多科研项目中，获得具有空间结构和生物学活性的重组蛋白是非常关键的步骤。虽然原核体系也能获得蛋白，但是由于宿主系统的限制，依然有很大一部分重组蛋白没有活性。
毕赤酵母体系是真核体系中操作简单、成本低廉的系统，在蛋白加工、折叠、翻译后修饰等方面具有诸多优势，在毕赤酵母体系中蛋白转录后糖基化所增加的寡糖链长度（平均每个支链8-14 个甘露糖残基）非常接近高等真核生物的结构，活性几率大大高于原核体系。
钟鼎生物的 ZoonYeast™ 酵母蛋白表达体系具有丰富的宿主细胞资源和载体选择经验，同时改造并开发了的GAP启动子的创新pYE-GAPα载体。进一步改善了蛋白诱导表达的操作步骤，无需在诱导过程中更换培养基，也无需在表达过程中检测甲醇含量，有效的提高细胞密度及蛋白产量。
| 毕赤酵母体系蛋白表达实验步骤及交付标准 | |||
|---|---|---|---|
| 1、表达体系系统选择（客户提供表达菌株的略过此步骤，仅提供表达质粒的可选择需要电转化的表达菌株） | |||
| 1.1、可选表达载体 GAP启动子载体：pYE-GAPα，； 常规商业化载体：分泌表达：pPICZαA、pPIC9K， 胞内表达：pPICZA、 pPIC3.5K |
1.2、可选表达菌株 GS115，X33菌株 SMD116蛋白酶缺失型菌株 |
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| 2、毕赤酵母表达载体构建 | 交付材料及数据 | 实验周期 | 价格 |
| A：基因优化 亚克隆设计 合成基因 B：亚克隆至载体 C: 质粒中抽及线性化-10ug |
1、基因合成报告 2、测序验证报告 3、包含表达质粒的大肠杆菌DH5a 4、表达质粒 5、线性化检测图片 |
基因合成 2周左右
亚克隆 1-2周 线性化 2-3天 |
酵母蛋白表达服务属于科研型服务项目，为了给您提供更专业、细致的服务支持
请拨打免费电话 400-066-8086 |
| 3、毕赤酵母蛋白表达鉴定 | 交付材料及数据 | 实验周期 | |
| D、电击转化 E、阳性克隆子筛选（PCR法） F、高拷贝菌株筛选（可选） G、表达小试（5-10菌株） H、表达分析鉴定（WB） I、定株，优化表达条件 |
6、阳性表达菌株 7、PCR鉴定阳性菌株图 8、高拷贝阳性菌株（可选） 9、小试表达流程报告 10、WB实验结果 11、小试表达总结 |
电转化及鉴定 1-2周 高拷贝筛选 2-3周（可选） 表达小试及鉴定 1-2周 |
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| 4、毕赤酵母蛋白纯化及鉴定 | 交付材料及数据 | 实验周期 | |
| J、放大培养2-5升 K、表达上清液浓缩 L、Ni柱低压亲和纯化 M、PAGE分析纯化过程 N、WB鉴定纯化后蛋白 O、PFM检测（可选） P、MS检测（可选） |
12、蛋白纯化流程报告 13、蛋白纯化原始图片 14、发货蛋白 15、Western Blot（标签抗体） 16、蛋白指纹图谱（可选） 17、蛋白质谱分子量（可选） |
放大培养 2-3周 蛋白纯化 1-2周 WB 1周 PMF 2-3周 MS 1-2周 |
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说明：毕赤酵母细胞对密码子偏爱性要求较高，建议进行基因优化后再进行表达以提高成功率
1、正常情况下采用分步收费原则来收取费用，特殊订单承诺不成功不收费（详情请咨询公司技术支持 400-066-8086）
2、不同的蛋白表达量差异很大，我们会尽量提供mg级别以上的蛋白量给客户。
部分客户署名公司发表文章：
1.SARS-CoV-2 envelope protein impairs airway epithelial barrier function and exacerbates airway inflammation via increased intracellular Cl− concentration.Signal Transduction and Targeted Therapy (2024) 9:74(IF=40.8)
2.Malaria oocysts require circumsporozoite protein to evade mosquito immunity.NATURE COMMUNICATIONS | (2022) 13:3208(IF=14.7)
3.Identification and functional characterization of a novel BEL1-LIKE homeobox transcription factor GmBLH4 in soybean.https://doi.org/10.1007/s11240-018-1419-4(IF=12.085)
4.Nanopore efficiently identifies hepatitis D virus antigens in vitro assay.Materials Today Physics 46 (2024) 101479(IF=10)
4.Integration of genome wide association studies and coexpression networks reveal roles of PtoWRKY 42-PtoUGT76C1-1 in trans-zeatin metabolism and cytokinin sensitivity in poplar.New Phytologist (2021) 231: 1462–1477doi: 10.1111/nph.1746(IF=9.4)
5.Targeting HLA-F suppresses the proliferation of glioma cells via a reduction in hexokinase 2-dependent glycolysis.International Journal of Biological Sciences.Published: 2021.03.25.doi:10.7150/ijbs.56357(IF=9.2)
6.Discovery of Clinical Candidate (5-(3-(4-Chlorophenoxy)prop-1-yn-1-yl)-3-hydroxypicolinoyl)glycine, an Orally Bioavailable Prolyl Hydroxylase Inhibitor for the Treatment of Anemia.2020, 63, 17, 10045–10060(IF=7.3)
7.Adenosine Monophosphate-Activated Protein Kinase (AMPK) Phosphorylation Is Required for 20-Hydroxyecdysone Regulates Ecdysis in Apolygus lucorum.Int J Mol Sci. 2023 May 11;24(10):8587. doi: 10.3390/ijms24108587.(IF=6.2)
8.The major-effect quantitative trait locus CsARN6.1 encodes an AAA ATPase domain-containing protein that is associated with waterlogging stress tolerance by promoting adventitious root formation.2018 Mar;93(5):917-930. doi: 10.1111/tpj.13819. Epub 2018 Feb 2.(IF=7.1)
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