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酶联免疫吸附试验总结
下表中详细介绍了ELISA(酶联免疫吸附试验)常用方法。
酶联免疫吸附试验总结 | |||
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ELISA | 用途 | 需要的反应试剂 | 评价 |
间接 | 抗体筛选、表位定位 | 纯化或半纯化的抗原;含有抗体的测试液;连接有免疫动物免疫球蛋白的酶复合物 | 不需要使用预存的特异性抗体;需要相对大量的抗原 |
直接竞争 | 抗原筛选、检测可溶性抗原 | 纯化或半纯化的抗原;含有抗体的测试液;针对抗原特异性的酶-抗体复合物 | 只需2步的快速检测;极好地测定抗原的交叉反应性 |
抗体夹心法 | 抗原筛选、检测可溶性抗原 | 捕获抗体(纯化或半纯化的特异性抗体);含有抗原的测试液; 针对抗原特异性的酶-抗体复合物 | 最灵敏的抗原检测; 需要相对大量的纯化或半纯化的特异性抗体(捕获抗体) |
双抗体夹心法 | 抗体筛选、表位定位 | 捕获抗体;已免疫的种属特异性的免疫球蛋白,含有抗原的测试液;针对抗原特异性的酶-抗体复合物 | 不需要纯化的抗原;检测过程相对长,需5个步骤 |
直接细胞 | 筛选细胞的抗原表达;检测细胞抗原表达 | 表达感兴趣的抗原的细胞;针对细胞抗原特异性的酶-抗体复合物 | 大量筛选的灵敏检测;对检测混合细胞表达的异质性不灵敏 |
间接细胞 | 筛选针对细胞抗原的抗体 | 用于免疫的细胞;含有抗体的测试液;连接了已免疫的种属的免疫球蛋白的酶复合物 | 当细胞表面抗原表达处于低密度时可能无法检测出特异性抗体 |
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