无细胞表达系统(Cell-Free Protein Synthesis system,CFPS)是一种区别于传统蛋白表达的新型蛋白制备系统,添加外源目的mRNA或者DNA模板,利用细胞抽提物中的核糖体,RNA聚合酶,ATP等物质,并不断添加蛋白质合成所需的一些原料,如氨基酸、核苷酸、盐离子等,在体外环境中实现蛋白的表达。
钟鼎生物能够快速、简便、高通量的生产mg级的,生物活性的蛋白质。解决膜蛋白等复杂蛋白难以表达的难题。我们的无细胞表达系统能够在4h-1天内完成表达,成功率高达95%,欢迎咨询。
无细胞蛋白表达的原理是以外源DNA或mRNA为模板,利用细胞抽提物中的细胞合成机器,蛋白折叠因子及其他相关酶系,通过添加氨基酸和T7聚合酶和能量物质来实现蛋白的表达
无细胞表达服务步骤及交付标准 | |||
---|---|---|---|
载体构建工作 | 周期 | 交付标准 | 报价 |
A、基因优化及合成 B、PCR扩增表达全片段 |
2-3周 | 1、基因合成报告(含测序结果和酶切验证结果) | 在线询价 |
蛋白表达纯化 | |||
C、2mL体系放大纯化 D、WB鉴定 |
5个工作日 | 2、蛋白纯化流程报告 3、纯化得到的蛋白 |
ZD-18T是由钟鼎生物技术有限公司开发,专门针对无细胞蛋白表达的质粒载体。将目的基因亚克隆构建重组载体,采用HindIII+EcoRI双酶切,NdeI线性化重组载体,极大程度上提高了模板的投入量,提升了蛋白产量,减少杂蛋白。
客户提供序列,使用无细胞表达系统制备蛋白,为了增加产量,尝试优化各种条件。
蛋白表达鉴定
蛋白纯化