无细胞表达系统（Cell-Free Protein Synthesis system，CFPS）是一种区别于传统蛋白表达的新型蛋白制备系统，添加外源目的mRNA或者DNA模板，利用细胞抽提物中的核糖体，RNA聚合酶，ATP等物质，并不断添加蛋白质合成所需的一些原料，如氨基酸、核苷酸、盐离子等，在体外环境中实现蛋白的表达。
钟鼎生物能够快速、简便、高通量的生产mg级的，生物活性的蛋白质。解决膜蛋白等复杂蛋白难以表达的难题。我们的无细胞表达系统能够在4h-1天内完成表达，成功率高达95%(该数据来源于内部订单统计)，欢迎咨询。
无细胞蛋白表达的原理是以外源DNA或mRNA为模板，利用细胞抽提物中的细胞合成机器，蛋白折叠因子及其他相关酶系，通过添加氨基酸和T7聚合酶和能量物质来实现蛋白的表达
| 无细胞表达服务步骤及交付标准 | |||
|---|---|---|---|
| 载体构建工作 | 周期 | 交付标准 | 报价 |
| A、基因优化及合成 B、PCR扩增表达全片段 |
2-3周 | 1、基因合成报告（含测序结果和酶切验证结果） | 在线询价 |
| 蛋白表达纯化 | |||
| C、2mL体系放大纯化 D、WB鉴定 |
5个工作日 | 2、蛋白纯化流程报告 3、纯化得到的蛋白 |
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pCzn Free是由钟鼎生物技术有限公司开发，专门针对无细胞蛋白表达的质粒载体。将目的基因亚克隆构建重组载体，采用HindIII+EcoRI双酶切，NdeI线性化重组载体，极大程度上提高了模板的投入量，提升了蛋白产量，减少杂蛋白。
客户提供序列，使用无细胞表达系统制备蛋白，为了增加产量，尝试优化各种条件。
蛋白表达鉴定
蛋白纯化
部分客户署名公司发表文章：
1.SARS-CoV-2 envelope protein impairs airway epithelial barrier function and exacerbates airway inflammation via increased intracellular Cl− concentration.Signal Transduction and Targeted Therapy (2024) 9:74(IF=40.8)
2.Malaria oocysts require circumsporozoite protein to evade mosquito immunity.NATURE COMMUNICATIONS | (2022) 13:3208(IF=14.7)
3.Identification and functional characterization of a novel BEL1-LIKE homeobox transcription factor GmBLH4 in soybean.https://doi.org/10.1007/s11240-018-1419-4(IF=12.085)
4.Nanopore efficiently identifies hepatitis D virus antigens in vitro assay.Materials Today Physics 46 (2024) 101479(IF=10)
4.Integration of genome wide association studies and coexpression networks reveal roles of PtoWRKY 42-PtoUGT76C1-1 in trans-zeatin metabolism and cytokinin sensitivity in poplar.New Phytologist (2021) 231: 1462–1477doi: 10.1111/nph.1746(IF=9.4)
5.Targeting HLA-F suppresses the proliferation of glioma cells via a reduction in hexokinase 2-dependent glycolysis.International Journal of Biological Sciences.Published: 2021.03.25.doi:10.7150/ijbs.56357(IF=9.2)
6.Discovery of Clinical Candidate (5-(3-(4-Chlorophenoxy)prop-1-yn-1-yl)-3-hydroxypicolinoyl)glycine, an Orally Bioavailable Prolyl Hydroxylase Inhibitor for the Treatment of Anemia.2020, 63, 17, 10045–10060(IF=7.3)
7.Adenosine Monophosphate-Activated Protein Kinase (AMPK) Phosphorylation Is Required for 20-Hydroxyecdysone Regulates Ecdysis in Apolygus lucorum.Int J Mol Sci. 2023 May 11;24(10):8587. doi: 10.3390/ijms24108587.(IF=6.2)
8.The major-effect quantitative trait locus CsARN6.1 encodes an AAA ATPase domain-containing protein that is associated with waterlogging stress tolerance by promoting adventitious root formation.2018 Mar;93(5):917-930. doi: 10.1111/tpj.13819. Epub 2018 Feb 2.(IF=7.1)