免疫共沉淀(Co-IP)检测以抗体和抗原之间的专一性作用为基础,是用于研究蛋白质相互作用的经典方法。Co-IP检测到两种蛋白的结合,符合体内实际情况,检测结果可信度高,常用于验证两种已知蛋白的相互作用,以及寻找与已知蛋白相互作用的未知蛋白。
实验原理 抗体结合于琼脂糖磁珠上的Protein A/G,当抗体免疫沉淀抗原蛋白时,能与抗原蛋白结合的目的蛋白一并被沉淀下来,形成“目标蛋白+抗原蛋白+抗体+Protein A/G”免疫复合物,经免疫印迹或质谱检测目的蛋白。 |
免疫共沉淀特点
案例展示
用预先固化在argarose beads上Flag的抗体免疫沉淀带Flag标签的B蛋白,那么与A蛋白在体内结合的蛋白质B也能一起沉淀下来。再通过蛋白变性分离,对B蛋白所带标签GFP进行检测,进而证明两者间的相互作用
客户提供
蛋白样品:
(1) 客户提供基因序列:由钟鼎负责诱饵蛋白或目的蛋白的表达。
(2) 客户提供表达质粒:质粒需测序验证,提供测序峰图文件,防止基因模板或表达质粒本身碱基突变,造成实验延误。
(3) 客户提供蛋白样品:动植物组织/器官或含有含有诱饵蛋白及目标蛋白的裂解液5ml以上。
检测抗体:
(1) 客户提供:用于诱饵蛋白及目标蛋白免疫加测的抗体>20ul。
(2) 钟鼎提供:由钟鼎提供相关抗体
样品需-20℃冻存,冰袋运输。
免疫共沉淀(Co-IP)检测技术服务 | ||||
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套餐类型 | 服务内容 | 交付 | 周期 | 报价 |
常规套餐 | Co-IP | 1、原始数据 2、结果图片 3、标准实验报告(含实验步骤、流程) |
1-2周 | 在线询价 |
整体套餐 | 哺乳动物蛋白表达+Co-IP+MS(验证未知蛋白)/银染 | 1、基因合成报告 2、测序验证报告 3、实验原始图片 4、Co-IP实验报告 |
5-6周 | |
检测套餐 | 质谱检测MS/LC-MS(验证未知蛋白) 银染检测 |
1、原始数据 2、结果图片 3、标准实验报告(含实验步骤、流程) |
1-2周 |
技术交流
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