cDNA文库克隆基因

提供基于SMART方法的cDNA文库（cDNA Library）构建服务。使用的载体为pDNR-LIB。在连接、克隆cDNA片段时，进行了cDNA片段的长度筛选，基本上去除了400 bp以下的cDNA短片段，保证了较长cDNA片段的克隆效率。 

文库质量标准 
库容≥1.0×10⁶，普通样品平均插入片段长度≥1.0 kb

服务要求
请您提供新鲜的且尽量多的材料
1、如果实验材料为动物组织材料，样品质量需大于5g。
2、果实验材料为植物样品标本，样品质量需大于20g。 
3、如果实验材料为各种培养细胞，请您提供5×10⁷以上培养好的细胞。 
4、您也可以直接提供给我们Total RNA，但要保证RNA没有降解，需要通过电泳等方法进行判断，其纯度要求A260/A280≥1.8，样品总量需大于500ug。 

实验操作流程
1、总RNA提取； 
2、mRNA纯化； 
3、反转录合成cDNA第一链； 
4、PCR扩增合成双链cDNA； 
5、分级分离双链cDNA，去除小片段DNA； 
6、双链cDNA的消化与连接。 

周期与价格 
从提供实验材料起始构建一个样品的cDNA文库，费用为 12000元。如果客户需要克隆，费用为3000元（5ml甘油保存菌）根据实验难易程度，实验周期一般为4-8周。 

交付标准 
1、实验流程报告 
2、cDNA与载体的连接产物（20μl） 
3、QC报告 

服务说明 
关于实验的具体内容及要求，请与我们联系沟通。 如果您提供给我们Total RNA样品，我们首先需要进行RNA质量及纯度的检测。 实验过程中，我们会随时与您沟通所发生的问题，以便双方共同协商解决。 
我们可以对构建好的文库提供后续附加服务，如克隆菌保、PCR扩增、大量测序等，实验费用需另计。

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