体外转录是指在含有RNA转录酶、必要的蛋白质因子、核苷三磷酸等条件的体外无细胞系统中，，模仿体内转录过程以DNA为模板转录生成RNA的技术。
钟鼎生物采用进口试剂盒，效率高，特异性好，为您提供品质无二的rna体外转录技术服务，欢迎咨询。
体外转录技术原理
体外转录技术服务
| RNA体外转录技术服务 | |||
|---|---|---|---|
| 服务项目 | 周期 | 交付标准 | 询价 |
| 体外转录 | 7-10个工作日 | 1.浓度:≥200ng/ul 2.数量:5ug 3.纯度：＞90% by agarose gel electrophoresis 4.OD260/OD230：2.4~~2.0 5.OD260/OD280: 2.0~~1.7 6.储存溶液:ddH2O 7.外观检测:Clear and free of foreign particles | (片场长度建议200bp~2kb，大片段请联系技术支持商议实验策略) 电询：400-066-8086 |
| 体外转录RNA +地高辛(DIG)标记 | |||
| 体外转录RNA +生物素(Biotin)标记 | |||
如何确定需要的是正义链还是反义链转录本?
根据下游实验来选择：
①.获得某一特定组织或细胞的RNA，为原位杂交、northern杂交、southern杂交等制作标记探针，选择反义链转录本。
②.如果用于蛋白表达实验中的模板，研究目的基因的表达；制备qPCR的RNA标准品，选择正义链转录本。
采用基于PAS(PCR-based Accurate Synthesis)的方法，合成基因A，构建至载体pUC57中；设计引物，扩增目的基因，其中，上游基因的5’端增加T7 promoter序列TAATACGACTCACTATAGGG；扩增获得的产物，采用T7 RNA polymerase转录获得RNA；合成的RNA采用乙醇沉淀法进行纯化后进行RNA纯度分析；冻干保存。
| 质粒酶切鉴定 | RNA纯度分析 | |
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| 基因名称：A（OD260/OD280:1.82） 酶切鉴定：BamHI - EcoRI M：Marker（200,500,800,1200,2000,3000,4500） 1：酶切前质粒 2：酶切后质粒 |
M：Marker（100,250,500,750,1000,1500,2000 bp） 1：RNA |
加帽加尾标记
Lane M：DL2000 DNA Marker
Lane 1：体外转录加尾
Lane 2：体外转录
Lane 3：体外转录加帽
Lane 4：DIG标记体外转录
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