钟鼎生物的多抗定制开发平台拥有经验丰富的抗体制备技术人员、完善的抗体生产设施、先进的抗体制备技术，能够向广大用户提供价廉物美，品质优异的多克隆抗体制备技术服务，包括兔、鼠、羊多克隆抗体制备，除了宿主的不同外，免疫原也是多种多样，偶联后的多肽、天然或重组蛋白、全菌抗原、小分子抗原，每种抗原都有其自身的特性。
| 多克隆抗体制备流程 | |||
|---|---|---|---|
| 抗原准备 1-2周 | 客户提供抗原 1、游离多肽10mg 2、重组蛋白5-8mg 80%以上纯度 3、偶联小分子 4、全菌/多糖/灭活病毒等 |
钟鼎提供抗原 1、设计并合成多肽，偶联KLH或BSA 2、重组蛋白表达 3、小分子半抗原改造及偶联 |
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| 动物免疫 6-7周 | 可选免疫物种 1、rabbit（2只） 2、BALB/C Mouse（10只） 3、Boer goat（1只） 4、roman hens（2只） |
标准型免疫流程 免疫动物准备 免疫前采血 免疫3-4次 最终采血 |
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| 抗体纯化 1-2周 | 抗原亲和纯化 纯化血清中针对抗原的特异性抗体，纯度可达95%以上 |
Protein A/G 亲和纯化 纯化血清中所有的IgG，得率高，纯度可达95%以上 |
硫酸铵沉淀法纯化 初步纯化血清中所有的IgG，纯度可达85%以上 |
| 应用检测 1-2周 | ELISA检测 保证效价大于1：100000 |
Western Blot Co-IP IHC |
抗体应用开发 抗体偶联标记 抗体片段化 |
抗原设计——免疫原制备
抗体制备过程中存在一个常见问题，即宿主免疫产生的抗体与免疫原有特异性的反应，但应用于Western Blot/IP/IHC/IF时经常出现阴性实验结果，从而浪费了宝贵的时间和经费。这种遗憾主要来自于抗原设计不合理，依据当前的抗体制备技术水平，更好的办法是提高抗原特异性。我们会通过分析抗原分子的性质来设计免疫原性更好的抗原，为您提供更高品质的抗体。
服务提示
抗体制备服务过程，存在着一个令人困扰的遗憾，即产生的抗体与免疫抗原有着非常特异的、灵敏的反应，但是对于检测抗原，Western Blot经常出现阴性实验结果，浪费了宝贵的时间和经费。这种遗憾来主要来自于抗原设计不合理，依据当前的抗体设计及制备技术水平，更好的办法就是提高抗原特异性，抗体技术专家建议以下方案：
A、使用多肽为抗原时，分析抗原的亲水性和疏水性，预测蛋白序列膜外区和胞内区。尽量使用亲水性且裸露在膜外的多肽区域，必要时选择两条以上的多肽作为抗原。
B、尽量使用天然蛋白或重组蛋白（部分区域）作为免疫抗原，可以大大提高抗原的特异性，减少遗憾。
C、设置实验节点，例如实验前的文献检索、三免之后的抗血清检测，尽量避免可能存在的风险。
技术交流
部分客户署名公司发表文章：
1.Phosphorylation by mTORC1 stablizes Skp2 and regulates its oncogenic function in gastric cancer.Molecular Cancer (2017) 16:83(IF=27.69)
2.Crystal structure and cellular functions of uPAR dimer.Nature Communications.Published: 29 March 2022.(IF=16.6)
3.Inhibiting bridge integrator 2 phosphorylation leads to improved oocyte quality, ovarian health and fertility in aging and after chemotherapy in mice.Nature Aging(IF=16.6)
4.PKCβII phosphorylates ACSL4 to amplify lipid peroxidation to induce ferroptosis.Nature Cell Biology，2022(IF=17.728)
5.Malaria oocysts require circumsporozoite protein to evade mosquito immunity.NATURE COMMUNICATIONS | (2022) 13:3208(IF=14.7)
6.Transglutaminase 2 crosslinks zona pellucida glycoprotein 3 to prevent polyspermy.Cell Death & Differentiation (2022) 29:1466–1473(IF=13.7)
7.NLRP4E regulates actin cap formation through SRC and CDC42 during oocyte meiosis.Cellular & Molecular Biology Letters(2024) 29:68(IF=9.2)
8.Nilaparvata lugens salivary protein NlG14 triggers defense response in plants.Journal of Experimental Botany(IF=6.8)
9.Cell wall surface layer (S-layer) promotes colony formation in Microcystis: comparison of S-layer characteristics between colonial and unicellular forms of Microcystis and function conformation(IF=5.8)
10.Induced expression of small heat shock proteins is associated with thermotolerance in female Laodelphax striatellus planthoppers
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