16S rDNA · 26S rDNA D1/D2 区 · ITS 测序 · 16S 高通量测序 · 快速准确鉴定到种
通过 DNA 测序对微生物进行物种鉴定(菌种鉴定)是比传统生化鉴定更先进的鉴定方法。DNA 测序不依赖菌种本身特点,对所有菌种均可使用,比传统生化鉴定更加快速、准确。
钟鼎生物技术公司提供的微生物物种鉴定服务包括 细菌 16S rDNA 鉴定、真菌 26S rDNA 鉴定、真菌 ITS 鉴定,通过 PCR 扩增 16S rDNA 或 26S rDNA 片段,测序后在 GeneBank 或者 EzTaxon 对比即可。一般序列相似度在 97% 以上就可以认为是同种菌种。钟鼎生物技术通过大量实验优化的通用引物适用于 99% 以上的微生物,鉴定成功率在 95% 以上。
DNA 测序不依赖菌种自身生化特点,无论是否可培养、生长快慢,均可进行物种鉴定,覆盖范围远优于传统生化鉴定。
16S rDNA / 26S rDNA / ITS 测序比对,一般序列相似度 97% 以上即可判定为同种,多数样本可鉴定到种水平。
经大量实验优化的通用引物,适用于 99% 以上的微生物样本,鉴定成功率在 95% 以上,减少重复实验。
细菌可选 16S rDNA 部分或全序列、16S 高通量测序;真菌可选 26S rDNA D1/D2 区或 ITS 区,按研究目的灵活选择。
细菌 16S rDNA:16S rRNA 其大小在 1,500 bp 左右,所代表的信息量适中,因此是进行菌种鉴定研究的理想材料。16S rDNA 部分序列鉴定针对 16S rRNA 测序约 500 bp,全序列鉴定针对 16S rRNA 全长测序约 1,500 bp,序列越长分辨力越高。
真菌 26S rDNA:真菌大亚基上的 26S rDNA 分子,可分为 D1、D2…D12 等多个区域,其中 D1/D2 区域序列长度适中,适合于真菌菌种鉴定。常规检测 26S rDNA D1/D2 区片段(约 600 bp)。
真菌 ITS:真菌的 ITS(Internal Transcribed Spacer)基因,包括 ITS1 及 ITS2 两部分,进化速度快,具有多态性,适于对亲缘关系较近的菌株进行区分性的菌种鉴定,扩增片段长度约 300-1000 bp。
| 服务项目 | 服务说明 | 服务价格 | 周期(工作日) |
|---|---|---|---|
| 16S rDNA 部分序列鉴定 | 针对 16S rRNA 测序(500 bp) | 在线询价 | 8 工作日 |
| 16S rDNA 全序列鉴定 | 针对 16S rRNA 全长测序(1500 bp) | 10 工作日 | |
| 真菌 26S rDNA 鉴定 | 26S rDNA D1/D2 区片段测序(600 bp) | 10 工作日 | |
| 真菌 ITS 鉴定 | ITS 区片段(300-1000 bp) | 10 工作日 | |
| 16S 高通量测序 | 百万级别的序列信息 | 10 工作日 |
实验报告:包含 PCR 产物照片、菌种鉴定 NCBI 进化树比对结果、测序彩色峰图、序列碱基报告。
注:对于鉴定的菌株,我们不做备份及保留,请送检之前做好保种工作。
通过 DNA 测序对微生物进行物种鉴定,是比传统生化鉴定更先进的方法。DNA 测序不依赖菌种本身特点,对所有菌种均可使用,且比传统生化鉴定更快速、更准确。常用靶标包括细菌 16S rDNA、真菌 26S rDNA D1/D2 区以及真菌 ITS 区。
细菌 16S rRNA 大小约 1,500 bp,所代表的信息量适中,是菌种鉴定研究的理想材料。真菌大亚基上的 26S rDNA 可分为 D1、D2…D12 等多个区域,其中 D1/D2 区域序列长度适中,适合真菌菌种鉴定。真菌 ITS 基因包括 ITS1 及 ITS2 两部分,进化速度快、具有多态性,适于对亲缘关系较近的菌株进行区分性鉴定。
测序后在 GeneBank 或 EzTaxon 比对,一般序列相似度在 97% 以上就可以认为是同种菌种。个别菌种由于微生物数据库相关数据缺乏,只能鉴定到属。
样品形式可以是新鲜菌液、斜面培养基、平面培养基或者提取好的 DNA。如果样品为基因组 DNA,要求 DNA 浓度大于 20 ng/μL,体积大于 20 μL。对于某些致病性菌体,请提前说明,注意保护工作人员健康及环境卫生。
实验报告包含 PCR 产物照片、菌种鉴定 NCBI 进化树比对结果、测序彩色峰图、序列碱基报告。对于鉴定的菌株,钟鼎生物不做备份及保留,请送检之前做好保种工作。
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