亲和纯化 · 离子交换 · 分子筛 · 疏水/反相层析 · HPLC精纯 · 一站式蛋白纯化解决方案
蛋白纯化是一项复杂的过程,包括粗分离、初步纯化和精细纯化等多个步骤。实验方法包括抽提、沉淀、离心、层析等多种手段。钟鼎生物拥有高超的蛋白纯化技术人员,可以根据蛋白性质设计亲和纯化、离子交换、分子筛、疏水和反相等多种蛋白纯化实验方案,获得初步纯化的蛋白质,再通过制备级别的HPLC获得纯度高达99%以上的纯品蛋白,获得的纯品蛋白可以满足蛋白质折叠、重结晶等精细实验要求。
从密码子优化、基因合成到表达质粒构建,再到蛋白表达纯化,一条龙服务。
ISO9001认证,严格的内控体系,保证纯化蛋白的质量。
AKTA系列纯化系统,完成从实验室基础研究到整个工艺方法快速开发及放大。
微信直接查询订单进度,实验最新进展一手掌握。
| 服务项目 | 说明 | 报价 |
|---|---|---|
| 标签蛋白的酶切及分离纯化 | 使用商品化的亲和纯化树脂,分离纯化带有 6xHis、GST、SUMO、MBP 融合蛋白,获得纯度 85% 以上融合蛋白,该方法操作简便、成本易控制、蛋白得率在 70% 以上。 | 在线询价 |
| 携带标签的重组蛋白纯化 | 使用诸如肠激酶、凝血酶、SUMO 酶等蛋白酶,切除标签蛋白,再进一步分离纯化目标蛋白。 | |
| 包涵体变复性纯化 | 将包涵体变复性操作,将不溶的包涵体重新折叠至可溶状态,溶解于 PBS 或 Tris-HCl 缓冲液,鉴于部分蛋白的性质特殊,不承诺所有的蛋白都可以透析去除盐溶液。 | |
| 高纯度蛋白制备 | 两种方案可供选择: ① His/GST 标签蛋白 SDS-PAGE 纯度不低于 90%。 ② His/GST 标签蛋白 SDS-PAGE 纯度不低于 95%。 |
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| 无标签蛋白纯化 | 可采用融合 Sumo 标签再切除的方法获得,也可直接表达无标签蛋白纯化获得。 |
| 服务项目 | 说明 | 报价 |
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| 天然大分子蛋白分离纯化 | 结合待分离的蛋白理化性质,适当选用适合孔径的分子筛截留分离纯化,配合阴离子柱或阳离子柱,使用 HPLC 分离设备,收取指定洗脱峰,可以获得纯度 95% 以上的天然蛋白。 | 在线询价 |
| 天然小肽分离纯化 | 通过分子筛初步截留大分子蛋白,使用大孔树脂或反向树脂纯化小分子化合物,进一步通过 HPLC 和 MS 对小肽分子鉴定,由于小肽分子一般含量较低,获得的蛋白量较少。 | |
| 未知蛋白混合物分离纯化 | 客户需告知待分离蛋白的基本特性,由钟鼎分离纯化,最终通过质谱鉴定、活性鉴定等多种方案确认分离产物。 |
钟鼎生物提供重组蛋白纯化(标签蛋白的酶切及分离纯化、携带标签的重组蛋白纯化、包涵体变复性纯化、高纯度蛋白制备、无标签蛋白纯化)和天然蛋白纯化(天然大分子蛋白分离纯化、天然小肽分离纯化、未知蛋白混合物分离纯化)两大类服务,可根据蛋白性质设计亲和纯化、离子交换、分子筛、疏水和反相等多种实验方案。
通过制备级别的 HPLC 可获得纯度高达 99% 以上的纯品蛋白。标签融合蛋白纯度可达 85% 以上、蛋白得率 70% 以上;高纯度蛋白制备方案中,His/GST 标签蛋白 SDS-PAGE 纯度可选择不低于 90% 或不低于 95%;天然大分子蛋白分离纯化可获得纯度 95% 以上的天然蛋白。
重组蛋白纯化需提供表达菌株或表达产物,同时提供重组蛋白表达实验相关背景;天然蛋白纯化需提供目的蛋白的大致分子量范围、蛋白缓冲液成份及天然蛋白的相关背景资料。双方可签署保密协议以保障客户知识产权。
钟鼎生物承诺交付双方约定的纯度及质量的纯品蛋白质,如无法完成实验或达不到约定的要求,则不收取任何费用。天然蛋白大规模纯化之前需安排预实验进行小试,无论预实验是否能分离到目的蛋白,会收取预实验的实验成本费用;大规模分离时,依据小试的实验条件核定报价。
钟鼎生物使用肠激酶、凝血酶、SUMO 酶等蛋白酶切除标签蛋白,再进一步分离纯化目标蛋白;也可采用融合 SUMO 标签再切除的方法获得无标签蛋白。
钟鼎生物使用 AKTA 系列纯化系统,可完成从实验室基础研究到整个工艺方法快速开发及放大,并拥有 ISO9001 认证,严格的内控体系保证纯化蛋白的质量。
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