DNA Marker 2000

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小片段DNA的分离,对分子量标准提出了更高的要求。DNA Marker 2000 由特定分子量的双链 DNA 片段组成,已混有上样缓冲液,适用于凝胶电泳时作为 DNA 分子量标准。所有片段均由等质量不同长度 DNA 片段组合而成的质粒经酶切、纯化后获得,因此电泳时条带更加清晰、致密,条带之间的质量比更精确、真实。

📋 本文内容速览
  1. 产品概述:为什么适合小片段DNA分离
  2. 产品参数一览
  3. 使用案例
  4. 使用方法与操作建议
  5. 注意事项与常见现象解读
  6. 常见问题解答(FAQ)
PART 01产品概述:为什么适合小片段DNA分离

本制品是由特定分子量的双链 DNA 片段组成,已混有上样缓冲液,适用于凝胶电泳时作为 DNA 分子量标准。

本制品中所有片段均由等质量不同长度 DNA 片段组合而成的质粒经酶切、纯化后获得。这一制备方式带来了两个直接优势:

1条带更加清晰、致密

由于所有片段来自同一质粒的酶切产物,各片段之间的比例固定且精确,电泳时条带形态规整,不易出现拖尾或弥散。

2条带之间的质量比更精确、真实

若上样量为 5 μl,每条带的 DNA 量约为 25 ng。这种精确的质量比设计,使得各条带的亮度差异具有可预期的规律。

核心优势:DNA Marker 2000 的片段范围集中在较低分子量区间,适合用于小片段 DNA 的分离与鉴定。建议配合 1.5-2% 琼脂糖凝胶使用,可获得最佳的分离效果。

PART 02产品参数一览
产品名称 DNA Marker 2000
货号 ZD20001
保存 4℃(长期保存请置于 -20℃)
产品组成 特定分子量的双链 DNA 片段,已混有上样缓冲液
质量比设计 上样量 5 μl 时,每条带的 DNA 量约为 25 ng
指示剂 已添加二甲苯腈蓝和溴酚蓝两种电泳指示剂

规格小结:产品已预混上样缓冲液,无需加热,直接上样即可;4℃ 短期保存、-20℃ 长期保存,使用方便;每条带 25 ng 的均匀上样量,使得各条带亮度基本一致,便于直接对比判断。

PART 03使用案例

下图为 DNA Marker 2000 在琼脂糖凝胶电泳中的实际检测结果,可见各条带清晰、致密,分子量分布规律,证明该产品可作为可靠的 DNA 分子量标准使用。

DNA Marker 2000 使用案例
图1 DNA Marker 2000 琼脂糖凝胶电泳结果
💡 案例解读

从结果可以看出,各分子量条带在凝胶上分布均匀,条带清晰锐利,无明显拖尾或杂带。由于每条带的 DNA 量约为 25 ng,各条带亮度基本一致,便于直接对比判断。当你的待测样本条带位置不确定时,可以用这个 Marker 作为参照快速判断片段大小。

PART 04使用方法与操作建议
1上样

本品无需加热,直接取 5 μl 加入琼脂糖凝胶的加样孔中,进行电泳。

2电泳条件

建议电泳条件为 1×TAE 缓冲液,1.5-2% 琼脂糖凝胶,正负极之间电压 4-10 V/cm。

3指示剂位置参考

本品中已添加二甲苯腈蓝和溴酚蓝两种电泳指示剂。若使用 1% 琼脂糖凝胶,二甲苯腈蓝条带所处位置约为 4 Kb,溴酚蓝条带所处位置约为 400 bp。

4染色与观察

电泳结束后 EB 或其他染料染色,在紫外灯下观察电泳条带。

操作提示:电泳图像的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。使用高质量的琼脂糖以及经常更换电泳缓冲液可达到较好的效果。琼脂糖凝胶浓度对于 DNA 条带的分离效果至关重要,请根据待分离片段的大小选择适合浓度的琼脂糖凝胶。

PART 05注意事项与常见现象解读

在使用 DNA Marker 2000 时,以下现象属于正常情况,无需担心:

为什么等质量的DNA条带着色深浅和粗细不同?

等质量的 DNA 条带经电泳、EB 染色后,分子量较小的着色浅、条带粗;分子量较大的着色深、条带细,属正常现象。这是因为 EB 染色是基于 DNA 质量进行结合的,而条带的粗细则与 DNA 片段的大小和扩散程度有关。

为什么长时间电泳后小片段条带模糊、亮带不明显?

EB 染色剂的电性和 DNA 相反,如琼脂糖凝胶在配制过程中预先添加了 EB,在电泳时 EB 会向 DNA 相反的方向迁移。当进行长时间电泳后,会出现 DNA Marker/Ladder 中分子量较小的片段模糊、亮带不明显等现象,属正常情况。建议控制电泳时间,或改用后染色方式。

如何获得更好的电泳效果?

电泳图像的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关,使用高质量的琼脂糖以及经常更换电泳缓冲液可达到较好的效果。琼脂糖凝胶浓度对于 DNA 条带的分离效果至关重要,请选择适合浓度的琼脂糖凝胶进行电泳。

保存提示:4℃ 保存即可(长期保存请置于 -20℃)。避免反复冻融,建议分装保存。若发现产品出现沉淀或颜色异常,建议停止使用并联系技术支持。

PART 06常见问题解答(FAQ)
DNA Marker 2000 有什么特点?
本制品是由特定分子量的双链DNA片段组成,已混有上样缓冲液,适用于凝胶电泳时作为DNA分子量标准。所有片段均由等质量不同长度DNA片段组合而成的质粒经酶切、纯化后获得,因此电泳时条带更加清晰、致密,条带之间的质量比更精确、真实。若上样量为5μl,每条带的DNA量约为25ng。
DNA Marker 2000 应该如何使用?
本品无需加热,直接取5μl加入琼脂糖凝胶的加样孔中,进行电泳。建议电泳条件为1×TAE缓冲液,1.5-2%琼脂糖凝胶,正负极之间电压4-10V/cm。本品中已添加二甲苯腈蓝和溴酚蓝两种电泳指示剂。若使用1%琼脂糖凝胶,二甲苯腈蓝条带所处位置约为4Kb,溴酚蓝条带所处位置约为400bp。电泳结束后EB或其他染料染色,在紫外灯下观察电泳条带。
为什么 DNA Marker 2000 建议使用 1.5-2% 琼脂糖凝胶?
DNA Marker 2000 的片段范围集中在较低分子量区间,使用较高浓度的琼脂糖凝胶(1.5-2%)可以更好地分离这些较小片段。如果使用过低浓度的凝胶,小片段会迁移过快,条带之间难以区分;而 1.5-2% 的凝胶孔径更小,能够有效分辨 200-2000bp 范围内的DNA片段。
为什么电泳后分子量较小的DNA条带模糊、亮带不明显?
EB染色剂的电性和DNA相反,如琼脂糖凝胶在配制过程中预先添加了EB,在电泳时EB会向DNA相反的方向迁移。当进行长时间电泳后,会出现DNA Marker/Ladder中分子量较小的片段模糊、亮带不明显等现象,属正常情况。建议使用高质量的琼脂糖并经常更换电泳缓冲液,以获得较好的电泳效果。
DNA Marker 2000 应该如何保存?
4℃保存即可(长期保存请置于-20℃)。避免反复冻融,建议分装保存。电泳图像的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关,使用高质量的琼脂糖以及经常更换电泳缓冲液可达到较好的效果。琼脂糖凝胶浓度对于DNA条带的分离效果至关重要,请选择适合浓度的琼脂糖凝胶进行电泳。

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