Southern Blot 平台 · 直观反映端粒长度 · 助力细胞状态与生长发育研究
端粒(Telomere)是真核生物染色体末端由特殊 DNA 序列与特定蛋白质结合形成的复合体,在细胞分裂过程中避免染色体末端融合和错误降解,以维持染色体的结构完整与稳定。端粒 DNA 由大量简单的串联重复序列组成,由端粒酶合成,在个体的生长发育过程中会发生长度改变、重复序列改变和重排等变化。
端粒长度是反映细胞状态的一项重要指标。检测端粒长度的方法有多种,其中 Southern Blot 是最常用的方法——操作简便、成本较低,能很直观地反映端粒长度。钟鼎生物的 Southern Blot 平台能为您提供高效的端粒检测服务。
依托成熟的 Southern Blot 杂交检测平台,采用地高辛标记探针,无需同位素,安全高效地完成端粒长度检测。
相比 TRF、Q-FISH 等方法,Southern Blot 操作流程简便、试剂成本较低,适合批量样本的端粒长度横向比较。
显影条带直接呈现端粒片段的长度分布(TRF 分布范围),能直观反映样本端粒的平均长度及长度异质性。
涵盖基因组 DNA 提取、限制性内切酶酶切、探针设计合成、杂交显影及数据分析,交付完整实验报告,省心省力。
端粒检测整体流程分为三大阶段:第一阶段从样本中提取高质量的基因组 DNA,并进行限制性内切酶酶切,将基因组 DNA 切割为适合电泳分离的片段;第二阶段设计并合成地高辛标记的端粒特异性探针,同时通过琼脂糖凝胶电泳将酶切产物按分子量大小分离;第三阶段将 DNA 片段转膜固定,与标记探针杂交,经显影后获得端粒片段的长度分布信号。整个流程约需 2-3 周,最终交付基因组 DNA 电泳图、酶切电泳图、探针电泳图及完整实验报告,实验结果可直接用于端粒长度与细胞状态的比较分析。
| 实验项目 | 交付材料 | 周期 | 报价 |
|---|---|---|---|
| 基因组 DNA 提取 | 基因组 DNA 的电泳检测图 | 1 周 | 在线询价 |
| 限制性内切酶对基因组 DNA 进行酶切 | 基因组 DNA 酶切电泳检测图 | ||
| 地高辛标记的探针设计合成 | 探针电泳检测图 | ||
| Southern blot 杂交:琼脂糖凝胶电泳、转膜、固定、杂交、显影 | 实验报告 | 1-2 周 | 在线询价 |
作者研究的是人类端粒蛋白的细胞定位和相互作用。他们发现 TIN2、TPP1 和 POT1 在细胞质和细胞核中都定位并相互作用,破坏 TPP1 核输出可能导致端粒 DNA 损伤反应和端粒长度失调。TPP1 也是端粒长度的关键调节因子。为了了解 TPP1 核输出在端粒长度控制中的作用,作者比较了表达不同 TPP1 突变体的 HTC75 细胞的平均端粒长度。
检测端粒长度的方法有多种,其中 Southern Blot 是最常用的方法。其原理是:基因组 DNA 经限制性内切酶酶切后,通过琼脂糖凝胶电泳分离,转膜固定后与地高辛标记的端粒探针杂交,最终显影得到端粒片段的长度分布信号。该方法操作简便、成本较低,能很直观地反映端粒长度。
基因组 DNA 提取、限制性内切酶酶切以及地高辛标记探针的设计合成约需 1 周;Southern blot 杂交、转膜、固定、杂交与显影约需 1-2 周。具体周期可结合样本数量在线沟通确认。
交付材料包括:基因组 DNA 电泳检测图、基因组 DNA 酶切电泳检测图、探针电泳检测图,以及完整的实验报告。
Southern Blot 是端粒长度检测的经典方法,操作简便、成本较低,无需特殊标记仪器;检测结果以条带信号呈现,能直观反映样本端粒的平均长度及长度分布差异,适用于植物、动物等多种真核生物样本的端粒研究。