文献信息

文献标题	OAF Blocks SIAH1-Mediated Degradation of SCPX, a Therapeutic Strategy for MASLD
文献译名	OAF阻断SIAH1介导的SCPX降解——治疗代谢功能障碍相关脂肪性肝病（MASLD）的新策略
期刊名称	Advanced Science
发表时间	2026年8月（在线发表）
影响因子	14.1
通讯作者	邓成（四川大学华西医院）、来珊珊（南京师范大学）
单位	南京师范大学生命科学学院、四川大学华西医院高原医学中心、卡罗林斯卡医学院等

研究背景Part.01

代谢功能障碍相关脂肪性肝病（MASLD）（曾称非酒精性脂肪肝病，NAFLD）是全球最常见的慢性肝病，以肝内脂质异常蓄积、炎症为特征，可进展为肝硬化甚至肝癌。目前临床获批药物如resmetirom（THR-β激动剂）和semaglutide（GLP-1R激动剂）虽有一定疗效，但缓解率有限（resmetirom约26%~30%，semaglutide约63%），且伴随胃肠道反应、代谢紊乱等不良反应，仍有大量患者无法受益。因此，寻找新靶点、开发更安全有效的治疗策略是当前研究热点。

OAF（out at first homolog）是一种进化保守的分泌蛋白，在肝脏高表达，被生物信息学预测为BRICHOS分子伴侣家族新成员，但其生物学功能长期未获实验验证。SCPX（sterol carrier protein X）是一种过氧化物酶体蛋白，参与脂肪酸氧化、胆固醇转运及脂质代谢，其缺失会加剧肝脏脂质蓄积。近期研究发现，E3泛素连接酶SIAH1可催化SCPX的泛素化降解，进而促进MASLD进展。然而，是否有内源性因子保护SCPX免受降解，此前尚不清楚。

文章内容Part.02

研究人员首先发现，在小鼠和人类中，OAF表达水平与血脂谱及BMI呈显著负相关：高脂饮食（HD）喂养小鼠、ob/ob及db/db肥胖小鼠的肝OAF mRNA均下调，高甘油三酯或高胆固醇患者的血清OAF浓度也显著降低。利用Oaf全身敲除小鼠，证实OAF缺失会加剧HD诱导的肝脏脂肪变性、血清转氨酶及血脂升高，但不影响摄食和葡萄糖耐量。相反，腹腔注射重组OAF蛋白或肝脏特异性过表达OAF，可显著减轻肝脂蓄积和血清代谢紊乱，且未观察到明显毒副作用。

在机制层面，通过免疫共沉淀联合质谱，鉴定出SCPX为OAF的核心互作蛋白。微量热泳动（MST）和免疫荧光共定位验证了二者直接结合。OAF不影响Scpx基因转录，但能显著提高SCPX蛋白（58kD前体和46kD成熟体）的稳定性。进一步研究发现，OAF通过物理性遮蔽SCPX的泛素化位点，抑制SIAH1对SCPX的多泛素化修饰，从而延长SCPX半衰期。功能下游，OAF/SCPX轴下调脂肪酸合成酶（ACC1）等脂生成基因，上调胆固醇酯化酶（ACAT2）及脂肪酸氧化相关基因，促进脂质代谢向分解和排泄方向倾斜。

关键验证实验表明，在Scpx敲除小鼠中，重组OAF蛋白的上述保护效应完全消失，证明SCPX是OAF发挥抗MASLD作用的必需下游效应子。此外，OAF通过内吞途径进入肝细胞，且其作用主要局限于肝脏，不依赖全身性代谢改变。

1. OAF表达与MASLD严重程度呈负相关

研究者通过公共数据库（GDS6248）分析发现，高脂饮食喂养8~24周的小鼠肝Oaf mRNA显著低于正常饮食组；ob/ob和db/db肥胖小鼠肝Oaf亦下调。体外用油酸/棕榈酸（OA/PA）处理HepG2细胞，同样降低Oaf表达。临床样本ELISA显示，高TG、高TCHO或高LDL-C患者的血清OAF浓度均显著低于正常对照组，且血清OAF与BMI呈负相关。这些结果表明，OAF的减少是脂代谢紊乱的一个伴随特征，提示其可能参与疾病进程。

2. Oaf缺失加剧MASLD，补充OAF则改善症状

构建Oaf全敲除小鼠，经21周HD喂养后，KO小鼠肝重、肝TG/TCHO含量显著高于WT，HE及油红O染色显示更严重脂滴蓄积。血清ALT、AST、TG、TCHO、NEFA、LDL-C均升高，HDL-C降低。但GTT、ITT及摄食量无差异，说明OAF不影响糖代谢和食欲。同时，在HepG2中敲低OAF也显著增加OA/PA诱导的TG积累。

相反，对HD喂养的野生型小鼠连续28天腹腔注射重组OAF蛋白（1 mg/kg/day），肝重量、肝脂含量、血清转氨酶和血脂均显著回落，油红染色减轻。AAV介导的肝特异性Oaf过表达也得到类似保护效果，且未见心、肺、肾组织损伤。OAF补充可逆转MASLD表型，且安全性良好。

3. OAF与SCPX直接结合，调控下游脂代谢基因

通过肝组织裂解液的Co-IP结合质谱，OAF抗体捕获的蛋白中SCPX丰度最高（正常和脂肪肝中均存在）。反向Co-IP和免疫荧光共定位证实二者在细胞内共定位；MST显示OAF与SCPX具有直接结合亲和力（KD值纳摩尔级）。AlphaFold3预测了结合模型。在Oaf-KO小鼠中，SCPX蛋白（58kD及46kD）水平显著下降，而mRNA不变；OAF注射则上调SCPX蛋白。此外，OAF缺失使脂合成酶ACC1（mRNA及蛋白）升高，而胆固醇酯化酶ACAT2降低；OAF补充则相反。这些数据表明，OAF通过结合SCPX，促进脂质酯化和氧化，抑制从头合成。

4. OAF抑制SIAH1介导的SCPX泛素化降解

已知SIAH1是SCPX的E3泛素连接酶，可促进其降解。研究者检测发现，Oaf-KO小鼠肝中SCPX泛素化水平显著升高，而注射OAF后泛素化水平降低。体外共转染实验显示，OAF与SIAH1竞争结合SCPX，且OAF存在时，SIAH1对SCPX的多泛素链修饰明显减弱。此外，OAF不影响SIAH1蛋白水平，仅通过空间位阻阻断其催化作用。OAF作为分子伴侣，保护SCPX免受泛素-蛋白酶体途径降解，这是其稳定SCPX的根本机制。

5. SCPX是OAF发挥保护作用的必需介质

为最终验证SCPX的下游必要性，研究者构建Scpx-KO小鼠，给予HD喂养，并注射重组OAF。结果显示，在Scpx缺失情况下，OAF无法降低肝重、肝TG/TCHO、血清ALT/AST及血脂，油红染色也无改善。这说明OAF的全部代谢改善效应都依赖于SCPX的存在，SCPX是OAF功能的核心执行者。

6. OAF的摄入途径与药代动力学

实验表明，OAF通过内吞途径进入肝细胞：用氯丙嗪（网格蛋白介导内吞抑制剂）或甲基-β-环糊精（脂筏抑制剂）预处理可阻断OAF的细胞内摄取。溶酶体抑制剂Baf A1可轻度提升OAF水平，提示部分内化OAF被降解。在大鼠中，单次腹腔注射OAF（0.5 mg/kg）后血清半衰期约为6小时，支持其作为蛋白药物的可行性。

7. 临床转化潜力与创新性

本研究首次实验证实OAF属于BRICHOS分子伴侣家族，并揭示其特异性底物SCPX。通过稳定SCPX，OAF有效缓解MASLD的肝脂蓄积和全身代谢紊乱。与现有药物相比，OAF不影响糖代谢和摄食，未引起明显不良反应，且可注射给药，为MASLD提供了一种全新的蛋白替代治疗策略。更重要的是，该工作提出了“通过外源性补充内源性伴侣蛋白来保护关键代谢酶”的原创概念，可推广至其他代谢性疾病。

研究总结与展望Part.03

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