慢病毒表达服务

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慢病毒钟鼎生物技术支持

    慢病毒系统是理想的可以在多种细胞类型(如原代细胞、干细胞和非分裂细胞)中实现可重复的稳定表达的基因表达工具。对于难转染的细胞而言,采用病毒递送外源基因的方式是非常有效的选择。慢病毒通过顺式作用元件将病毒运送到细胞核,并将要表达的基因序列整合到细胞的基因组中。采用慢病毒可以得到持续稳定的高表达。钟鼎生物采用慢病毒系统进行高滴度的复制缺陷型慢病毒颗粒的生产,从而可以有效转导几乎所有分裂和非分裂细胞类型。

原理

    慢病毒是逆转录病毒的一种,具有逆转录病毒的基本结构,但也有不同于逆转录病毒的组份和特性,作为基因治疗载体发展起来,最近已用于转基因动物制备。利用慢病毒构建的shRNA/miRNA载体,与化学合成的siRNA和基于瞬时表达载体构建的shRNA相比,一方面可以扩增替代瞬时表达载体使用,另一方面,lentivirus-shRNA/miRNA克隆经过慢病毒包装系统包装后,可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞和处于非分裂状态的细胞,并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组,进行长时间的稳定表达。

慢病毒原理


钟鼎优势

质量保证 安全无忧 稳定性强
质量保证 安全无忧 稳定性强

确保制备的病毒颗粒携带片段的正确性,病毒颗粒的总数和病毒颗粒的滴度达到要求。

去除了病毒的关键蛋白,且改造为自身失活性,病毒转导并整合到细胞后不再具有产生具有包装能力的病毒基因组。

稳定整合到细胞基因组,可用于制备多种稳定沉默特定基因的细胞株。


服务流程

   1.含目的基因的慢病毒载体的构建和纯化提取;

   2.慢病毒表达载体、pGag/Pol、pRev、pVSV-G四质粒共转染293T细胞;

   3.培养48-72h,收集培养上清;

   4.病毒的纯化和浓缩;

   5.滴度测定、目的基因检定;

   6.将制得的慢病毒液转导客户的靶细胞,筛选混合稳定细胞株,并检测靶基因的表达。

服务列表

慢病毒相关
服务编号 服务名称 价格
BM101 慢病毒表达 请致电:
400-066-8086
钟鼎生物技术支持
BM102 慢病毒RNAi干扰
BM103 Crispr/Cas9慢病毒
BM104 Tet-on慢病毒
服务说明:
   客户提供:含有目标基因的质粒(提供测序图谱)或所要表达的目的基因的名称,序列;所需要的病毒滴度及总量,病毒是否需要纯化;若需要检测外源基因的表达,如需要请提供相应的抗体。
   交付产品:提供重组后的慢病毒载体质粒,并附上对目的基因的PCR鉴定结果;提供已测定好滴度、可以直接进行后续分析的慢病毒储存液。