植物样品激素含量检测-液相质谱联用

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植物样品激素含量检测

    植物激素又称为内源激素或天然激素,是由植物自身代谢产生的一类有机微量物质,由特殊部分产生并运送到作用部位,即使再很低浓度下也可产生明显的生理效应,研究植物不同组织或相同组织不同处理条件下激素含量的变化,对于研究植物的生理研究具有积极的意义,也为化学合成的人工激素协同处理提供指导。

植物激素检测

技术交流

客户使用钟鼎植物激素检测服务发表的文章: Cuicui You, et al (2016). Effect of removing superior spikelets on grain filling of inferior spikelets in rice. Fronteris in Plant Science 2016-7-1161 doi: 10.3389.



  钟鼎生物2015年推出的植物激素检测服务,使用液质联用的方法,精确、高效的检测植物激素含量变化。目前已建立非常成熟的检测平台,可检测的植物激素包含吲哚乙酸(IAA),脱落酸(ABA),赤霉素(GA3),玉米素(Z),反式玉米素核糖苷(tZR),茉莉酸甲酯(MEJA),水杨酸(SA) 等等。对于其他常见激素或以上激素的同类物质可以购买标样、摸索方法后检测,如吲哚丁酸(IBA),赤霉素类物质(GA4等),对于稀有的激素分子,如客户提供标准样品,我们也可摸索条件,单独检测。

  此外,针对与样品数量较大,对数据精度要求不高的一部分科研用户,钟鼎生物也可采用酶联免疫的方法,使用中国农大研发的ELISA试剂盒进行ELISA检测生物激素含量,但由于误差较大,批次间准确度很难保证,建议有条件的客户选用液质联用法,以确保数据真实可靠,如有需要可直接询问 400-066-8086或邮件至order@zoonbio.com

液质联用法检测植物激素服务列表

植物材料样品植物激素检测服务
服务编号
可测激素
检测方法
周期 联系我们
BH100 吲哚乙酸 (IAA) 外标法 1-2周 实验周期及详细报价
请电询400-066-8086
或在线咨询
钟鼎QQ技术支持
同位素内标法
BH101 吲哚丁酸(IBA) 外标法 1-2周
BH102 脱落酸 (ABA) 外标法 1-2周
同位素内标法
BH103 赤霉素 (GA1 GA3 GA4 GA5 GA6 GA7 GA8 GA9 GA13 GA14 GA15 GA19 GA20 GA24 GA29 GA44 GA51 GA53) 外标法 1-2周
同位素内标法
BH104 玉米素 (Z) 外标法 1-2周
BH105 反式玉米素核苷 (tZR) 外标法 1-2周
同位素内标法
BH106 异戊烯基腺嘌呤(IP) 外标法 1-2周
同位素内标法
BH107 异戊烯基腺苷(IPA) 外标法 1-2周
同位素内标法
BH108 水杨酸 (SA) 外标法 1-2周
同位素内标法
BH109 水杨酸甲酯 (MESA) 外标法 1-2周
BH110 茉莉酸 (JA) 外标法 1-2周
同位素内标法
BH111 茉莉酸甲酯 (MEJA) 外标法 1-2周
同位素内标法
BH112 油菜素内酯 (BL、CS、6-DeoxoCS) 外标法 2-3周
BH113 独脚金内酯
(5-deoxo-Strigol Strigol)
外标法 2-3周
BH114 1-氨基-环丙烷羧酸(ACC) 外标法 2-3周
BH115 1-氨基-环丙烷羧酸合酶(ACC合成酶) 外标法 2-3周
BH200 其他植物激素类物质 请联系技术支持  

外标法:用待测组分的纯品作对照物质,以对照物质和样品中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法称为外标法。
内标法:在样品处理前,将一定量与待测组分在结构性质相近的待测物质(通常为同位素标记的)加入样品及标准品中,根据内标在样品基质及标品中的响应值之比来校正待测物含量。
同位素标记的待测物质易与样品中待测物质区别,因此使用内标法获得的精度更高,操作成本也较高。目前我们采用的稳定同位素内标包括:D-IAA, D-SA, D-GA4, D-TZR, D-ABA, 及2种非同位素内标2H-JA及2H-MeJA.

植物样品中激素检测设备

钟鼎生物检测激素含量方法目前主要是利用安捷伦A1290高效液相色谱联用AB Sciex QTRAP® 6500,可有效同时对多种物质进行高精度的检测。
1、QTRAP® 6500 LC/MS/MS系统是目前最灵敏的质谱系统,可以在同一台质谱上能提供最高灵敏度的定量分析数据和定性分析数据。它将串联四极杆的扫描方式和线性离子阱的扫描方式完美地结合在一起,是最佳质谱分析平台。
2、MRM扫描模式下有普通三重四级杆质谱10倍以上的灵敏度,灵敏度可达10-9 g以上,部分物质灵敏度可达fg级。
3、MRM通道数量:一次进样,不分时间段,可同时检测>1000个MRM离子对,并保证灵敏度和重现性不受损失。高达12,000 Da/sec的扫描速度充分发挥UHPLC的性能,每个超快速液相色谱峰可获得更多的数据点。
4、正负切换时间:≦20 ms,且保证多个正化合物和多个负化合物同时分析时,灵敏度和重现性不受明显损失。

实验仪器

合作程序

常规订单流程如下(绿色为客户的配合工作),如遇特殊情况,协商沟通;希望我们紧密配合,为您提供优质的服务

订单流程

 



植物激素检测服务案例

本实验目的为检测样品中的吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA)、水杨酸(SA)、赤霉素(GA3)、茉莉酸(JA)。

一、 试剂和耗材
样品:客户提供植物样品、待检测激素标准样品、色谱级甲醇等。

二、 主要实验仪器(略)

三、实验步骤
3.1激素提取 (此部分涉及到公司的核心工艺,此处提供常规的提取工艺流程
3.1.1准确称量约0.5 g新鲜植物样品,于液氮中研磨至粉碎;
3.1.2向粉末中加入5 ml异丙醇/盐酸提取缓冲液,4 ℃震荡30 min;
3.1.3加入10 ml二氯甲烷,4 ℃震荡30 min;
3.1.4 4 ℃,13000 rpm离心5 min,取下层有机相;
3.1.5避光,以氮气吹干有机相,以250ul-500ul甲醇(0.1%甲酸)溶解;
3.1.6过0.45um 滤膜,进HPLC-MS/MS检测。

3.2液质检测
3.2.1.标准溶液配制
以甲醇(0.1%甲酸)为溶剂配制梯度为1 ng/ml,5 ng/ml,50 ng/ml,100 ng/ml,200 ng/ml的IAA、GA3、JA、ABA、SA标准溶液。
3.2.2.液相条件
色谱柱:安捷伦ZORBAX 300SB-C18反相色谱柱(4.6×150,3 um);
柱温:30 ℃;
流动相:A:B=(甲醇/0.1%甲酸):(水/0.1%甲酸);
洗脱梯度:0-2 min,A=20 %;2-14 min,A递增至80 %;14-15 min,A=80 %;15.1 min,A递减至20 %;15.1-20 min, A=20 %
进样体积:2 ul。

3.2.3.质谱条件

质谱条件

四、实验结果与分析 (为保护客户数据,此处简略数据示意

植物激素检测结果

样品中含量=平均浓度*体积系数(既最终加入溶剂的体积)/质量系数(既最初称取的样品质量)
叶、茎中GA3含量极低,其离子特征峰峰面积带入标曲后数值偏小,可能原因是由于含量过低所以目标峰受到基线或杂质的影响较大。在不考虑杂质影响的情况下,估计叶中GA3含量可能在0.005 ng/g~0.03 ng/g左右,茎的GA3含量可能在0.005 ng/g~0.02 ng/g左右,叶的GA3含量可能在0.01 ng/g~0.015 ng/g左右,这个估值仅作为参考。

五、原始数据
原始数据包括标准品检测数据及标准曲线,样品检测原始数据及换算数据,我们确保每个数据均有原始的数据记录,客户可用于原始数据记录、论文撰写、文章发表等各种用途。

实验原始数据



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钟鼎生物资质