植物激素检测服务案例

本实验目的为检测样品中的吲哚乙酸（IAA）、脱落酸（ABA）、水杨酸（SA）、赤霉素（GA3）、茉莉酸（JA）。

一、 试剂和耗材
样品：客户提供植物样品、待检测激素标准样品、色谱级甲醇等。

二、 主要实验仪器（略）

三、实验步骤
3.1激素提取 (此部分涉及到公司的核心工艺，此处提供常规的提取工艺流程）
3.1.1准确称量约0.5 g新鲜植物样品，于液氮中研磨至粉碎；
3.1.2向粉末中加入5 ml异丙醇／盐酸提取缓冲液，4 ℃震荡30 min；
3.1.3加入10 ml二氯甲烷，4 ℃震荡30 min；
3.1.4 4 ℃，13000 rpm离心5 min，取下层有机相；
3.1.5避光，以氮气吹干有机相，以250ul-500ul甲醇（0.1%甲酸）溶解；
3.1.6过0.45um 滤膜，进HPLC-MS/MS检测。

3.2液质检测
3.2.1.标准溶液配制
以甲醇（0.1%甲酸）为溶剂配制梯度为1 ng/ml，5 ng/ml，50 ng/ml，100 ng/ml，200 ng/ml的IAA、GA3、JA、ABA、SA标准溶液。
3.2.2.液相条件
色谱柱：安捷伦ZORBAX 300SB-C18反相色谱柱（4.6×150,3 um）；
柱温：30 ℃；
流动相：A:B=（甲醇/0.1%甲酸）:（水/0.1%甲酸）；
洗脱梯度：0-2 min，A=20 %；2-14 min，A递增至80 %；14-15 min，A=80 %；15.1 min，A递减至20 %；15.1-20 min, A=20 %
进样体积：2 ul。

3.2.3.质谱条件

四、实验结果与分析 （为保护客户数据，此处简略数据示意）

样品中含量=平均浓度*体积系数（最终加入溶剂的体积）/质量系数（最初称取的样品质量）
叶、茎中GA3含量极低，其离子特征峰峰面积带入标曲后数值偏小，可能原因是由于含量过低所以目标峰受到基线或杂质的影响较大。

五、原始数据
原始数据包括标准品检测数据及标准曲线，样品检测原始数据及换算数据，我们确保每个数据均有原始的数据记录，客户可用于原始数据记录、论文撰写、文章发表等各种用途。

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