植物激素检测服务案例

服务概述

植物激素检测服务案例

本实验目的为检测样品中的吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA)、水杨酸(SA)、赤霉素(GA3)、茉莉酸(JA)。

一、 试剂和耗材
样品:客户提供植物样品、待检测激素标准样品、色谱级甲醇等。

二、 主要实验仪器(略)

三、实验步骤
3.1激素提取 (此部分涉及到公司的核心工艺,此处提供常规的提取工艺流程
3.1.1准确称量约0.5 g新鲜植物样品,于液氮中研磨至粉碎;
3.1.2向粉末中加入5 ml异丙醇/盐酸提取缓冲液,4 ℃震荡30 min;
3.1.3加入10 ml二氯甲烷,4 ℃震荡30 min;
3.1.4 4 ℃,13000 rpm离心5 min,取下层有机相;
3.1.5避光,以氮气吹干有机相,以250ul-500ul甲醇(0.1%甲酸)溶解;
3.1.6过0.45um 滤膜,进HPLC-MS/MS检测。

3.2液质检测
3.2.1.标准溶液配制
以甲醇(0.1%甲酸)为溶剂配制梯度为1 ng/ml,5 ng/ml,50 ng/ml,100 ng/ml,200 ng/ml的IAA、GA3、JA、ABA、SA标准溶液。
3.2.2.液相条件
色谱柱:安捷伦ZORBAX 300SB-C18反相色谱柱(4.6×150,3 um);
柱温:30 ℃;
流动相:A:B=(甲醇/0.1%甲酸):(水/0.1%甲酸);
洗脱梯度:0-2 min,A=20 %;2-14 min,A递增至80 %;14-15 min,A=80 %;15.1 min,A递减至20 %;15.1-20 min, A=20 %
进样体积:2 ul。

3.2.3.质谱条件

质谱条件

四、实验结果与分析 (为保护客户数据,此处简略数据示意

植物激素检测结果

样品中含量=平均浓度*体积系数(最终加入溶剂的体积)/质量系数(最初称取的样品质量)
叶、茎中GA3含量极低,其离子特征峰峰面积带入标曲后数值偏小,可能原因是由于含量过低所以目标峰受到基线或杂质的影响较大。

五、原始数据
原始数据包括标准品检测数据及标准曲线,样品检测原始数据及换算数据,我们确保每个数据均有原始的数据记录,客户可用于原始数据记录、论文撰写、文章发表等各种用途。

实验原始数据

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