基因工程人鼠嵌合抗体制备

    基因工程抗体的出现，极大地推动了抗体技术的发展和抗体药物及诊断试剂的研发。我们成功建立了人鼠嵌合抗体及人源全长抗体改造系统。我们的系统包括基因克隆，载体构建，表达筛选、抗体制备及亲和力测定等一整套嵌合(全长)抗体制备程序。
    依靠我们先进的技术平台和专业的技术人员，可以将您的鼠源单克隆抗体进行人源嵌合化改造，或将您的小分子抗体进行全长改造,利用DNA重组技术将鼠单抗的轻、重链可变区基因插入含有人抗体恒定区的表达载体中，转化哺乳动物细胞表达出人鼠嵌合抗体，其人源化程度达到70%左右，完整地保留了异源单抗的可变区，最大限度地保持了其亲和活性，降低了免疫原性。    

技术路线：

1、通过质谱法/RT-PCR/RAC等方法对可变区的进行序列分析，获得重轻链可变区基因序列

2、通过基因合成/RACE/RT-PCR等技术手段，获得重轻链的可变区DNA序列，并将可变区DNA序列亚克隆至含有人抗体恒定区的表达载体上，通过酶切、测序等验证手段，验证质粒构建的准确性

3、制备去内毒素质粒，瞬时转染二氢叶酸还原酶(dhfr)缺陷型CHO细胞系，纯化少量抗体，检测其特异性及亲和力指数SPR

4、 经客户确认，建立稳转体系，加压筛选获得稳定表达的细胞株

5、 优化表达条件，加压筛选表达效率最高的的细胞株，获得基因工程抗体表达细胞株，建立稳定细胞系

 

基因工程人鼠嵌合抗体制备

基因工程人鼠嵌合抗体制备服务说明
客户提供交付标准	交付成果
1、待改造鼠源抗体的单克隆杂交瘤细胞株，细胞数目108以上 2、鼠源抗体重轻链可变区基因序列，如序列未知，则需委托钟鼎生物进行可变区测序服务 3、待改造鼠源抗体的识别靶标抗原 4、待改造鼠源抗体 5、其他具体细节要求	1、鼠源抗体与抗原Elisa/Western检测报告 2、可变区基因分析及测序报告 3、 瞬时表达产物1mg，纯度95%以上 4、 抗体识别抗原特异性ELISA或WB检测报告 5、达到约定表达水平的稳定的CHO细胞株1-2株 6、抗体识别抗原特异性ELISA/Western检测报告 7、细胞株抗体表达量ELISA检测报告，抗体亲和力SPR检测报告

保密承诺
1、双方约定原鼠源单克隆抗体相关知识产权和客户提供的实验材料归客户所有，钟鼎生物不对外提供细胞株及任何相关抗体实验材料，不利用客户实验材料开展此服务内容之外的研究和商业用途。
2、钟鼎生物在完成客户项目同时，所应用的嵌合抗体改造相关技术和嵌合抗体表达载体等材料属本公司所有。客户在使用过程中需承诺不扩散至第三方个人或企业
3、最终提供的的嵌合抗体的CHO工程细胞株及由其分泌的抗体归客户所有，未经客户同意，钟鼎生物不将为该客户提供的服务成果提供第三方个人或企业，也不得用于研究开发。

相关服务