新型冠状病毒(2019-nCoV)假病毒nCoV-M产品说明书

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假病毒nCoV-m介绍:将新型冠状病毒(2019-nCoV,参考序列为NC_045512)的M基因序列合成并克隆构建至慢病毒载体,在293T细胞内进行假病毒的制备。所获得的假病毒为慢病毒基因组中包含M基因669 base的RNA序列。可以用于病毒RNA提取实验和qPCR检测实验的对照品。

假病毒nCoV-M序列信息:

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产品规格:1ml/支,已灭活,其中nCoV-M RNA浓度不低于1E8拷贝/ml

存储条件及有效期:冻存于-40℃以下,有效期12个月

使用方法
1)假病毒融化:将假病毒从冰箱中取出,置于冰上融化或4℃条件下自然融化,待其完全融化后可进行相关的实验操作
2)假病毒核酸提取(材料自备),本产品可以使用膜吸附或磁珠吸附的试剂盒进行假病毒RNA的抽提。
3)QPCR检测(材料自备):假病毒RNA经RT-PCR成cDNA后进行QPCR定量检测实验。

注意事项:
1)冻融会导致假病毒的稳定性降低,从而影响核酸抽提的效果及QPCR检测结果,使用时应避免反复冻融
2)病毒灭活处理可能会导致RNA的降解,请根据实际实验需求合理选择
3)如果需要对本产品进行稀释处理,可以使用磷酸盐缓冲液(PBS)进行稀释
4)推荐使用量:50μL-100μL/次。建议各实验室根据实验情况做优化调整

质检标准:
1)假病毒nCoV-M的病毒基因组不低于1E8拷贝/ml(方法:使用nCoV-M标准病毒基因组进行绝对定量)
2)假病毒nCoV-M中的质粒残留量不高于nCoV-M RNA量的3%(方法:针对nCoV-M,进行non-RT和RT样品的定量,deltaCt>5)

附:慢病毒骨架载体为PDS085_pL-MCS (酶切位点:MCS区的NheI/AscI)

用于表达假病毒nCoV-M的慢病毒骨架载体

注意事项:公司目前的假病毒是用于做质控的阳性对照品,是灭活的病毒产品,主要用于检测类企业用户。科研用模拟病毒侵染的做后续细胞功能实验的假病毒(英文也叫假病毒)目前我们还在内部研发中。敬请期待!


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