高纯度蛋白制备-蛋白精细纯化-钟鼎生物

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重组蛋白表达技术作为研究蛋白功能、结构以及筛选靶向药物最有力的工具，在基础科学以及医药学等领域中发挥着不可替代的作用，获得高质量、高纯度以及高天然保真性的蛋白是科研中至关重要的第一步，为此，钟鼎生物推出高纯度蛋白制备服务，我们既可以采用His/GST标签纯化目的蛋白，可将蛋白的纯度提高到95%以上，欢迎咨询。

服务详情

项目名称	交付内容	周期	价格
90%纯度His/GST标签蛋白纯化	≥90%纯度蛋白表达菌株、质粒质检报告	5周	询价
95%纯度His/GST标签蛋白纯化	≥95%纯度蛋白表达菌株、质粒质检报告	6周	询价

案例展示

第一步.镍柱亲和层析纯化。

样品	填料	流速	结合缓冲液(ProtA)	洗脱缓冲液(PortB)	梯度
细菌破碎上清	Ni-IDA Beads，5mL	1mL/min	50mM Tris-HCl，150mM NaCl，20mM Imidazole，pH8.0	50mM Tris-HCl，150mM NaCl，500mM Imidazole，pH8.0	0%B运行30mL，20%运行30mL，100%B运行30mL。

第二步.离子交换层析纯化蛋白。

样品	填料	流速	结合缓冲液(ProtA)	洗脱缓冲液(PortB)	梯度
亲和纯化100%B洗脱组分脱盐后	SP Separose^TM Fast Flow，5mL	1mL/min	50mM Tris-HCl，pH8.0	50mM Tris-HCl，1M NaCl，pH8.0	0%B运行30mL，0%-100%B运行100mL，100%B运行30mL

第三步.凝胶过滤层析提高纯度。

样品	填料	流速	洗脱缓冲液(PortA)
疏水层析纯化洗脱组分浓缩后	Sephacryl^TM S-200 High Resdution，120mL	1mL/min	1xPBS，pH7.4

第四步.分析蛋白的亲疏水性，蛋白亲水性较强，尝试疏水层析纯化提高纯度。

样品	填料	流速	洗脱缓冲液(PortB)	结合缓冲液(ProtA)	梯度
凝胶过滤层析收集组分	Phenyl Beads 6FF，5mL	1mL/min	50mM Tris-HCl，pH8.0	50mM Tris-HCl，1.5M NaCl，pH8.0	100%B运行30mL，100%-0%B运行100mL，100%B运行30mL