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昆虫细胞培养中,常常会有一个问题,就是该选用悬浮培养还是贴壁培养的问题,两种方法各有利弊,各有千秋,下面我们就总结一些悬浮培养与贴壁培养的优缺点。
方法 | 简介 | 优点 | 缺点 |
---|---|---|---|
贴壁培养 | 细胞贴附在一定的固相表面进行的培养。 | 容易且廉价培养 | 需机械操作易造成活率较低。 |
在倒置显微镜下易于观察感染过程 | 需若干培养瓶(如:150cm2)用于扩大培养及高滴度病毒储存。 | ||
所有的细胞都可用这种方法维持培养(Sf9、Sf21、H5) | 单层限制每毫升细胞密度,影响蛋白产量。 | ||
悬浮培养 | 是一种在受到不断搅动或摇动的液体培养基里,培养单细胞及小细胞团的组织培养系统。 | 能产生从250mL到1L多高滴度储备液或表达的蛋白在每个摇瓶中。便于大规模蛋白表达 | 需摇瓶、旋转板、孵育箱,启动昂贵 |
需细胞密度高(Sf9需达到3.0×106个细胞/mL)这样能增加每毫升细胞培养的蛋白产量 | 按照生长模式和感染过程需每天细胞计数和活率测定 | ||
大量充氧和少量操作可增加细胞活率,细胞活率通常达98%或更高 | 难于维持无菌状态 | ||
Sf9和Sf21无需适应即可从贴壁转成悬浮培养反之亦然 | H5细胞需适应悬浮培养 |
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