•质粒转染
•内毒素去除
•细胞培养
细胞计数:
1、超净台紫外照射30 min,通风30 min;
2、酒精棉擦拭超净台后从培养箱拿出细胞,用酒精消毒表面后拿进超净台;
3、细胞要轻轻顺时针摇三次,逆时针摇三次后取样;
注意事项:最多同时取三瓶样品,所有细胞拿出培养箱时间控制不得超过半小时
4、细胞用手指弹匀后取10 ul细胞和10 ul台盼蓝混匀后取10 ul加入计数板;
5、样品加入后不得有气泡,不得漏到旁边的槽子中,否则重新取样;
6、最好静置3 min后显微镜下计数;
细胞计数原理
细胞计数原则
数上不数下,数左不数右,结团细胞数到能看得见的细胞为止,实在结团严重,按照计数的2-3倍的密度稀释传代,添加抗结团剂;
公式
细胞数/ml=4个大方格数/4*稀释倍数*10^4
每个小方格0.1mm^3=10-4ml
细胞计数操作视频演示
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