酵母单杂交技术是由Li等从酵母双杂交技术发展而来的（1993年），是根据DNA结合蛋白(即转录因子)与DNA顺式作用元件结合调控报告基因表达的原理，克隆与靶元件特异结合的转录因子基因的有效方法。
文库建立和文库筛选
互作验证
| 服务内容 | 客户需提供 | 交付结果 | 价格 |
|---|---|---|---|
| 文库筛选 | 1、诱饵基因序列或诱饵质粒 （pHis2-Bait或pAbAi-Bait）； 2、文库质粒（不少于50ug AD文库质粒/每次筛库） （客户最好能提供文库质检相关信息：如物种、库容、文库滴度、文库cDNA片段大概的大小等） |
1、质粒在受体菌的阳性菌 2、提供详细的、完整的实验报告，清晰的实验图片 3、筛选结果的测序结果和质粒 |
在线询价 |
| 蛋白-蛋白点对点互作验证 | 1、pHis2-Bait或pAbAi-Bait和AD-prey质粒 2、或者Bait和Prey序列，质粒由我们构建 |
1、提供详细的、完整的实验报告，清晰的实验图片 2、在受体菌的阳性菌 |
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| 自激活和毒性验证 | 1、pHis2-Bait或pAbAi-Bait质粒 2、或者Bait序列，质粒由我们构建 |
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| 酵母质粒提取和测序 | 酵母菌液或者具有菌斑的平板 | 1、提供详细的、完整的实验报告 2、筛选结果的测序结果和质粒 |
1 诱饵菌株构建
使用BstbI限制性内切酶将4 µg pAbAi重组质粒线性化。
图1. 线性化检测结果：
LineM：1Kb Marker
Line1：为酶切前
Line2：为酶切后
由图1可知c线性化成功，可以进行诱饵菌株构建实验。
2 整合鉴定
图2. 整合鉴定结果：
LineM：2000bp Marker
Line1：阳性对照
Line2：阴性对照
Line3-6：阳性菌株
由图2鉴定结果，pAbAi-peak3诱饵质粒正确整合到Y1H菌株里面，可以进行自激活检测实验。
3 自激活检测
图3.自激活检测结果
自激活检测结果分析：Y1HGold[pAbAi-peak3]在SD/-Ura平板上正常生长，但在SD/-Ura with AbA（100ng/mL）平板上没有生长，所以pAbAi-peak3有自激活，用100 ng/mL AbA进行后续筛选实验。
4 文库筛选
初筛
图4.SD/-Leu with AbA（100ng/mL）初筛图片
二筛
为了去除假阳性，在初筛平板上挑选88个克隆，点板至SD/-Leu with AbA（100ng/mL）平板，进行二次筛选确认。
图5 .SD/-Leu with AbA（100ng/mL）二次筛选图片
二次筛选结果显示：再次划线到SD/-Leu with AbA（100ng/mL）平板上的克隆全部生长，由此可以确认初筛的88个克隆均为阳性克隆。
6 阳性克隆测序
将生长状态良好，且经过复筛的单克隆进行菌落PCR测序，测序结果进行blast比对后最终获得63个克隆。
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