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SPR技术(Surface Plasmon Resonance,表面等离子共振技术)可以提供实时的、非标记的分子相互作用信息,监控整个分子间的结合过程,并计算出分子之间的亲和力(KD)、结合速率(ka)、解离速率(kd) 等重要数据;用于各类小分子化合物、多肽、蛋白质、寡核苷酸和寡聚糖直至类脂、噬菌体、病毒和细胞等相互作用的研究。SPR 是制药行业的“金标准”, 被收录进《2020版中国药典》。

钟鼎生物提供的SPR技术服务是基于Biacore仪器,我们可以为客户提供快捷高效的分子互作检测服务,包括活性检测、抗体筛选、表位作图、一致性评价和质量控制检测等各种科研服务。


 SPR的优势


技术优势


一、SPR技术基本原理

SPR降低特定角度反射的光强度,当分子结合到传感器表面时,SPR角随金表面折射率变化而变化,而折射率的变化又与金表面结合的分子质量成正比。传感器、微流控系统和SPR检测器三者共同工作,来检测生物分子的相互作用,对反射指数变化的检测结果构成传感图。

SPR的原理

二、Biacore仪器简介

  • Biacore仪器
  • 分析流程
  • 传感芯片
  • 动力学分析
Biacore仪

基于SPR原理的生物分子相互作用分析系统,通过实时、无标记的分析手段对分子结合过程加以研究。

Biacore分析流程

Biacore的基本分析流程包括:实验设计、固定配体、样品进样、芯片再生、数据分析。

传感芯片

15种不同的传感芯片可供选择。

动力学分析

结合常数Ka :
·代表复合物(RL)的形成速率,在1M的R和L下,每秒产生的复合物数量
·单位为M-1S-1,一般从103到107M-1S-1
解离常数Kd :
·反应了复合物的稳定性,每秒钟解离的复合物的百分比
·单位为S-1,一般在10-2至10-5S-1
·Kd=0.01S-1,即为每秒钟有1%的复合物解离
·Kd越大,解离越快



三、SPR样品要求


SPR的样品要求

四、案例介绍

(1)蛋白与多糖互作检测

参考文献:Structural Basis of Specific Recognition of Non-Reducing Terminal N-Acetylglucosamine by an Agrocybe aegerita Lectin

SPR检测蛋白与多糖互作案例

Biacore检测AAL2与GlcNAc及GlcNAc β1-3Galβ1-4GlcNAc结合

分割线

(2)DNA与蛋白互作检测

参考文献:Natural Variation Underlies Differences in ETHYLENE RESPONSE FACTOR17 Activity in Fruit Peel Degreening

SPR检测蛋白与DNA互作案例

分割线

(3)小分子天然产物新靶点发现与验证

参考文献:Highly selective inhibition of IMPDH2 provides the basis of antineuroinflammation therapy

小分子天然产物新靶点发现与验证

五、SPR检测相关服务

定量判断结合亲和力 MST微量热泳动
Octet RED384系统 BLI分子互作
基因表型互作 分子互作技术专题
检测制备标记 抗体服务专题
建库筛库 酵母双杂交
凝胶/电泳迁移率实验 EMSA

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