在基因转录调控研究的过程中，可以简化为转录因子蛋白 TF 与 DNA 序列的结合问题。

为了解锁上述奥义，经典的技术 Chip-seq 应运而生。但是在植物 科学领域，Chip 级别的抗体难以获得，遗传转化材料的获取周期较长， 阻碍了研究进程。随着生物技术的创新发展，特别是高通量测序技术的日益成熟， 近几年涌现出 Dap-seq，Cut&tag,ATAC-seq 等一系列新的技术手段， 转录因子蛋白与 DNA 结合的面纱被一层层解开。转录因子蛋白捕获结合的 DNA 片段，通过高通量测序获得 peak 序列。结合基因组序列信息及注释信息，经由 MEME 解析，可以获 取与转录因子特异性结合的 motif sequence.

随着研究的深入，新的问题随之而来，如何才能用实验的手段， 证明转录因子的精准结合 motif 序列？

Motif 文库筛选策略——精准定义转录因子结合 DNA 基序！

一、Motif 文库筛选原理

Motif 文库是基于酵母单杂的实验原理逆向开发的一种实验策略。 首先简单介绍酵母单杂交的原理：利用启动子中 DNA 序列能够特异 性结合转录因子蛋白（TF）的这一特性。以 DNA 序列为诱饵，从酵 母文库中筛选猎物蛋白（TF），只有当 TF 与 DNA 序列特异性结合， 启动下游报告基因。

Motif 文库的工作原理是诱饵与猎物角色互换，以转录因子蛋白 （TF）为诱饵，只有当 TF 与 Motif 文库中特定 DNA 序列相结合时， 启动下游报告基因，从而得到与 TF 结合的 Motif 序列。

motif文库工作原理视频解析

二、TF锁定靶基因流程示意

三、Motif 文库使用说明

选用 8N 随机引物建库，插入到 pHis2 质粒的 MCS 区域（替换 sma I 位点，替换形式如下图所示），理论的库容量为 1X4⁸，含有 65536 条 motif 序列。

Motif- Logo

四、Motif 文库申请流程

钟鼎生物已经构建了8N-motif文库，无需耗费人力物力来重复构建。我们可以“免费”提供给您使用。

五、配套的质粒&菌株

产品名称	交付标准	数目	储存条件
Y187 Yeast Strain	50 µl	1	-80℃
pGADT7 Vector	2 µg	1	-20℃
阳性对照诱饵	2 µg	1	-20℃
pHIS2-Motif(8N)	5 µg	1	-20℃
pHIS2 Vector	2 µg	1	-20℃
阳性对照猎物	2 µg	1	-20℃

六、Motif 文库筛选相关