RNA Pull down检测服务

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服务概述

RNA pull-down以感兴趣的RNA序列为中心,寻找与该序列结合的蛋白质,最常见的应用是寻找某特定基因启动子区域的转录因子。其原理为应用特定的生物素标记寡核苷酸片段与转录因子蛋白结合的特性,以此检测核蛋白对目的核苷酸的识别作用。对目的片段的PCR产物进行生物素标记,通过链霉亲合素固定到磁珠上。当核酸与蛋白质发生结合后,将游离的蛋白质洗脱,即得到核酸与蛋白质结合产物。

RNA Pull down技术路线

RNA Pull down技术路线

RNA Pull down服务介绍

RNA Pull down 检测服务
服务项目 服务内容 周期 交付内容 价格
制备正义链反义链探针 体外转录法 2周 WB 检测结果;
检测质谱图;
实验报告
询价
在线QQ技术支持2
RNA pull down 捕获目标目标RNA及其结合蛋白 2周
Western blot 验证靶蛋白类型 1周
LC-MS 实验组、阴性对照 2周

RNA Pull down检测服务样品要求

建议选择顺丰快递,干冰运输,以避免样本降解。为保证样品及时处理,请避免样品在周末或法定节假日到达实验室。请在送样前与您的客户经理沟通样品送达时间。实验样品剩余样品钟鼎生物默认不做返还,请您注意保留备份。如需返还务必请在实验开展前书面说明并通知销售经理,且样品返还可能会产生额外的运输费用。希望得到您的理解!

样品类型 样品量 运输标准 注意事项
细胞样品 5*107个/份 干冰运输 悬浮细胞常温离心(1000-1500 rpm,5 min),常温离心收集细胞。贴壁细胞用胰蛋白酶消化后,吹打收集,PBS洗涤细胞,去除多余培养基和胰蛋白酶。开盖液氮速冻15 min,-80℃保存。
组织样品 >2g 干冰运输 用解剖刀等迅速切成小碎块,约200 mg,放入2.0 ml离心管中,开盖液氮速冻15 min,-80℃保存。
注:解剖刀处理组织的时间尽量控制在1min以内。
液氮速冻是必须开盖,以防炸裂。
总蛋白 2mg/ml 干冰运输 每组量100ug,最少做五组,正义链实验组对照组,反义链实验组对照组,磁珠蛋白组,总蛋白量要500ug以上

案例展示

1.案例1

rna pull down案例1

Lane M:Protein Marker
Lane 1:Bioeast Mag-SA+蛋白
Lane 2:标记正义链探针+Bioeast Mag-SA+蛋白
Lane 3:标记反义链探针+Bioeast Mag-SA+蛋白

2.案例2

rna pull down案例2

Lane M:Protein Marker
Lane 1:Bioeast Mag-SA+对照组蛋白
Lane 2:Bioeast Mag-SA+正常组蛋白
Lane 3:Bioeast Mag-SA+过表达组蛋白
Lane 4:Bioeast Mag-SA+过表达组蛋白+标记正义链探针
Lane 5:Bioeast Mag-SA+正常组蛋白+标记正义链探针
Lane 6:Bioeast Mag-SA+对照组蛋白+标记反义链探针

3.生信分析

GO功能注释和分类

图4 GO功能注释和分类

KEGG Pathway通路注释和分类

图5 KEGG Pathway通路注释和分类

String蛋白质互作网络分析

图6 String蛋白质互作网络分析

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