兔单克隆抗体的优势

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服务概述

兔单克隆抗体的优势

兔单克隆抗体

1、高亲和力

  通常用解离系数(kd)描述抗体和抗原之间的结合强度,即亲和力。对于抗体药物来说,一般认为达到纳摩尔(nanomolar, 10-9 mol/L)级的解离系数就有高亲和力(对于大多数治疗用抗体其解离系数均要求达到纳摩尔或者亚纳摩尔级,kd=10-9 ~10-10 mol/L)。如前所述,兔单抗的高亲和力与其独特的免疫亲和成熟过程有关,因此兔单克隆抗体具有相当高的亲和力,其解离系数甚至可达到皮摩尔级(kd=10-12 mol/L)。这种高亲和力使得兔单抗在开发更灵敏的检测试剂以及更有效的药物方面具有巨大的应用潜力。

2、高特异性和低本底

  兔单抗具有非常强的结合特异性。通过蛋白质印迹(Western blot)实验研究大约1000个不同的兔单抗发现,大多数兔单抗能特异性地与目标蛋白条带结合。这种高特异性亦已被免疫组织化学实验进一步证实。与小鼠单抗相比,对相同的目标蛋白,兔单抗能得到更清晰的免疫组化图像,并且使石蜡切片上的背景染色大大降低。Rossi等应用兔单抗对肿瘤和正常组织切片上的雌激素受体、黄体酮受体、Ki-67、cyclinD1、CD3、CD5、CD23以及synaptophysin等靶标进行免疫组化染色后,发现兔单抗能在不降低特异性的前提下,提高检测的灵敏度。

3、可识别更多新型表位

  人纤维粘连蛋白免疫实验表明,与小鼠抗体相比,兔抗体能识别更多的表位:同时使数只小鼠和兔免疫,一定时间后取血,计算经蛋白酶消化后的人纤维粘连蛋白免疫印迹显示的条带数,发现兔抗体能识别更多的蛋白条带。利用兔特异性抗体会增加对于某些特殊抗原表位的识别能力,例如磷酸化位点以及其他转译后修饰的蛋白位点。利用兔单克隆抗体的这一特点可进行药物作用机理研究。

4、杂交瘤克隆数更多

  在药物筛选中,通常需要非常庞大的化合物库才能得到足够的候选药物,杂交瘤抗体药物的筛选也是这样。克隆杂交瘤可用小鼠和兔,兔和小鼠相比脾脏更大,可以融合的B淋巴细胞数量是小鼠的近50倍,因此每一次融合,能得到比小鼠多数倍的杂交瘤克隆。此外,研究发现兔杂交瘤细胞还较适于高密度培养,细胞传代的间隔时间与小鼠杂交瘤相比可以相应缩短。因此可用兔杂交瘤技术取代鼠杂交瘤技术来筛选抗体药物。

5、识别鼠源蛋白抗体

  研究者常使用啮齿类动物作为研究人类疾病的动物模型,并使用这些动物模型测试候选药物的治疗效果。目前科研最常用的动物是小鼠和大鼠。但是,鼠源抗体作为候选药物往往不能识别模型中的鼠源蛋白,要解决这个问题,必须从某种异源动物得到相应“替代抗体”用作动物模型的研究。例如,使用大鼠抗体作为小鼠抗体的“替代抗体”,反之亦然。可是“替代抗体”与候选治疗性抗体本身往往有很大差别,亲和力不同,甚至识别表位也不同。而应用兔单抗可解决这一问题。通过识别人和鼠源蛋白的共有表位,兔单抗可同时结合人和鼠源蛋白,也省去了制造“替代抗体”的步骤。

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