羊驼单域抗体sdAb-纳米抗体制备

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纳米抗体定制服务

      钟鼎生物以CRO为核心业务,在抗体发现领域深耕多年,具有成熟完善的技术。2012年公司组建羊驼单域抗体研究中心,2014年推出纳米抗体开发服务。随着2018年第一个纳米抗体药物Cablivi被EMA批准上市,国内外各药物研究机构对纳米抗体开发的需求日益增多。钟鼎生物可以提供抗原制备、羊驼免疫、PBMC分离、cDNA制备、抗体库构建筛选、纳米抗体表达纯化、抗体人源化等一站式服务。

纳米抗体制备

羊驼免疫周期表

免疫周期表
21天
二次免疫
抗原(0.5 mg)与弗氏不完全佐剂1:1混合,乳化后皮下多点注射
28天 采集1 mL 外周血,进行抗血清效价检测
42天
三次免疫
抗原与弗氏不完全佐剂(0.5 mg)1:1混合,乳化后皮下多点注射
49天 采集1mL 外周血,进行抗血清效价检测
63天
四次免疫
抗原与弗氏不完全佐剂(0.5 mg )1:1混合,乳化后皮下多点注射
70天 采集50 mL 外周血,进行抗血清效价检测、PBMC分离、RNA提取及cDNA制备用于纳米抗体库构建

 

 羊驼要求
采用1-2周岁羊驼(Alpaca)进行标准的四次免疫服务。

 抗原要求
   1.抗原纯度
   高纯度的抗原在产生免疫应答与筛选过程至关重要,因此建议客户抗原纯度在90%以上。我们在收到客户抗原后,会通过SDS-PAGE检测抗原纯度。
   2.抗原量
   蛋白抗原首次剂量为1 mg/只,加免剂量为0.5 mg/次/只,免疫共需蛋白3 mg/只,效价检测用抗原0.1 mg ,每只动物所需蛋白抗原量为3.1 mg 。
   细胞抗原免疫剂量为1.5x10e7 细胞/次/只,5次免疫共需细胞7.5x10e7细胞/只。
   根据不同抗原,需要客户提供不同量的抗原,请提前与技术人员沟通。同时客户不得隐瞒抗原是否具有致病、致死危险,如有隐瞒且造成实验动物死亡客户需要额外支付动物和项目成本费。
   3.抗原浓度
   抗原浓度大于0.5 mg/mL,且不含叠氮钠。

备注:不是所有的抗原都能使动物产生免疫应答,如果经过3~4次免疫后检测血清ELISA效价(OD450≈1.0)小于5000,建议终止项目,不再进行抗体库的构建与筛选。

羊驼免疫流程

羊驼纳米抗体制备

纳米抗体相关服务

纳米抗体