噬菌体展示羊驼纳米抗体文库制备

噬菌体展示技术（Phage Display）一种基因表达产物和亲和选择相结合的技术，是将外源蛋白或多肽的DNA序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置，使外源基因随外壳蛋白的表达而表达，同时，外源蛋白随噬菌体的重新组装而展示到噬菌体表面的生物技术。

科研者已开发出的噬菌体展示系统有：单链丝状噬菌体展示系统、λ噬菌体展示系统、T4噬菌体展示系统等多种噬菌体展示系统。

噬菌体展示羊驼纳米抗体制备步骤：

1、采取免疫或未免疫的羊驼外周血液；
2、提取总的mRNA，反转录成cDNA；
3、利用巢式PCR扩增VHH，使用限制性内切酶酶切噬菌体展示载体及VHH并连接两个片段；
4、将连接产物电转化至感受态TGl中，构建天然或免疫的羊驼源噬菌体展示纳米抗体文库。

噬菌体展示技术与其他两个技术的比较

噬菌体展示比较
内容	免疫血清	杂交瘤技术	噬菌体展示技术
抗体形式	多克隆抗体	单克隆抗体	单克隆抗体重组抗体
宿主细胞	N/A	杂交瘤	细菌
筛选范围	N/A	0-103	107-109
基因获取	N/A	再克隆	直接
时间	几个月	几个月	几周
费用	低	高	低
生产量	有限	有限	无限
操作	简单	复杂	相对简单
免疫	不可避免	不可避免	可避免
人源抗体	否	否	可以
应用前景	有限	有限	范围更广

噬菌体展示技术的应用

抗原抗体库的建立、抗原表位研究、病原检测、疫苗研究、药物设计、基因治疗、细胞信号转导研究等。

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