传统的ChIP-seq 是进行体内检测 TFBS 的主要方法,繁琐步骤和材料需求阻拦了很多科研进程。
DNA亲和纯化测序方法,成功将体内结合实验转移到体外,解决了ChIP抗体制备的困扰,极大的提高 DNA Binding Site发现的效率。
DAP-seq不仅能够超高通量查找TFBS,还能深入了解众多TF的生物学特性和结合位点结构,在任何有机体的顺反和表观研究中表现出巨大的价值。
具体方法为:通过体外蛋白表达技术,表达出带有标签的转录因子,和基因组 DNA 文库在体外进行结合,然后分离出所有与转录因子结合的 DNA,再使用高通量测序,找到转录因子的结合位点。
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1.High Osmotic Stress Increases OmpK36 Expression through the Regulation of KbvR to Decrease the Antimicrobial Resistance of Klebsiella pneumoniae.spectrum on 06 June 2022 by 113.56.232.76(IF =9.04)
该文章分析了KbvR调控外膜蛋白OmpK36在肺炎克雷菌致病及耐药中的作用和机制,其中DAP-seq结果由钟鼎生物完成。
本文分析了渗透压环境刺激对肺炎克雷伯菌生长、外膜蛋白表达、外膜通透性以及耐药性的影响及其可能的调控机制。证明KbvR作为一个新发现的转录调控因子,在高渗环境下,全局调控因子Fis可以直接感应渗透压环境压力并正调控KbvR的表达,再通过KbvR和OmpR正调控外膜蛋白OmpK36合成,导致细菌膜通透性增加,从而降低肺炎克雷伯菌对头孢西丁和头孢唑林的耐药性。本研究从环境因素的角度阐述了渗透压环境刺激对肺炎克雷伯菌耐药性的影响,为将来改善临床肺炎克雷伯菌多重耐药问题提供了一个新的治疗思路。
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