不染料拒染是一种简单而快速的检测细胞活力的技术，活细胞具有完整的包膜因而拒染，而死细胞却不能。不过此方法也存在问题:由于活力检测由细胞膜的完整性来间接的决定，因此，即使细胞膜是完整的，细胞活力也可能很弱(通过其生长能力或功能检测来反映)。相反，细胞膜不完整时，细胞可能通过自我修复而具有活力。另外一个潜在的问题是由于观察染料的摄取是通过主观判断，少量染料的摄取容易被忽略。在这方面，通过普通光学显微镜检测台盼蓝拒染与荧光显微镜检测荧光染料拒染的比较，发现荧光法能够检测到更多的没有活力的细胞。

    更为精确的检测细胞活力的方法是通过细胞对光的散射能力和对碘化丙啶的摄取。然而这一方法较繁琐，只有在需要检测细胞混合物中死细胞的数目时才有必要。

PBS或无血清的完全培养基

0.4% (m/V) 台盼蓝(避光保存，长期保存后需过滤，GIBCO/BRL)

1.取一定量方便计数的细胞悬液( 如5X 105个细胞/ml)，将细胞重悬于lml PBS,用0.4%台盼蓝稀释，100g 离心5min,弃上清。(译者注:该步骤可不用台盼蓝稀释)

2.用1ml PBS或无血清完全培养基重悬细胞(血清会染台盼蓝)。1 份0.4%台盼蓝与1份细胞悬液混合，在室温条件下孵育3min。

3.在3~5min内，滴一滴台盼蓝/细胞混合液于细胞计数板上(附录3A)。将计数板置于显微镜台上并聚焦。分别计数未着色(活细胞)和着色细胞(死细胞)。

4.活细胞数乘以2 (台盼蓝的稀释倍數)即得到活细胞总数。将总的活细胞数和死细胞数相加然后乘以2即得到样品中细胞总数。按照下面公式计算活细胞的百分率:

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