使用说明书

产品货号：MF-EE-0001

　　声明：尊敬的客户，感谢您选用本公司的产品。本产品适用于定量检测待测样本中天然或重组PAT/bar蛋白浓度。使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分！如有疑问，请及时联系钟鼎生物技术有限公司。

名称	规格	保存条件
ELISA酶标板（可拆卸）	8×12	4℃/-20℃
样品稀释液	1瓶 30mL	4℃
冻干标准品	2支	4℃/-20℃
浓缩HRP酶结合物	1支 80μL	4℃(避光)
酶结合物稀释液	1瓶 10mL	4℃
浓缩洗涤液（25×）	1瓶 30mL	4℃
底物溶液（TMB）	1瓶 10mL	4℃(避光)
反应终止液	1瓶10mL	4℃
产品说明书	1份
质检报告	1份

特别说明：

     #: 一周内使用可存于4℃，需长时间存放或多次使用建议存于-20℃。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些，请在使用时量取而非直接倒出！

检测原理

     本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗PAT/bar蛋白抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的PAT/bar蛋白会与包被抗体结合，HRP酶结合物也可特异性的与PAT/bar蛋白结合，形成包被抗体-PAT/bar蛋白-酶标抗体免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，PAT/bar蛋白浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中PAT/bar蛋白的浓度。

问题分析

     若实验效果不好，请及时对显色结果拍照，保留所用板条及未使用试剂，并妥善保存，然后联系我公司技术支持为您解决问题。同时您也可以参考以下资料：

问题	可能原因	相应对策
标准曲线梯度差	吸液或加液	检查移液器及吸头
	标准品稀释不正确	溶解标准品时稍微旋转瓶身，轻轻混匀使粉末完全溶解
	洗涤不完全	保证洗涤时间和洗涤次数及每孔的加液量
显色很弱或无色	孵育时间太短	保证充足的孵育时间
	实验温度不正确	使用推荐的实验温度
	试剂体积不够或漏加	检查吸液及加液过程，保证所有试剂按顺序足量添加
	稀释不正确
读数数值低	酶标仪设置不正确	在酶标仪上检查波长及滤光片设置
		提前打开酶标仪预热
变异系数大	加液不正确	检查加液情况
背景值高	检测抗体的工作浓度过高	使用推荐的稀释倍数
	酶标板洗涤不完全	重新阅读操作手册，保证清洗完全；如果用自动洗板机，请检查所有的出口是否有堵塞
	洗液有污染	配制新鲜的洗液
灵敏度低	ELISA试剂盒保存不当	按说明书要求保存相关试剂
	读数前未终止	OD读数前应在每孔中加入终止液