胶体金技术注意事项

用于标记和包被的抗原抗体要先纯化。对于产业化应用的抗原抗体大部分可以满足胶体金方法的要求，确定抗原抗体是否能应用于胶体金方法。
相对来说，胶体金方法对抗原抗体的要求是比较高的，因为不管是胶体金标记还是NC膜包被都是基于物理吸附作用，这种结合过程是相对脆弱的，很容易受到干扰。

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• 对于重组抗原来讲，基于镍柱纯化的蛋白会含有大量的咪唑，而微量的咪唑就足以使胶体金聚集、死金、沉淀；而以包涵形式表达的蛋白往往需要高浓度的尿素来溶解，尿素对胶体金的破坏也是非常严重的。
  在蛋白的保存过程中，可能会加入一些甘油、蔗糖之类的物质作为保护剂，而这些保护剂由于其强亲水性，对胶体金方法的标记和包被都会产生不利的影响。
• 对于天然抗原来讲，如果天然抗原浓度和纯度能够满足要求，是可以使用的。
• 对于多抗来说，应该避免某些纯化方法（如硫酸铵沉淀法）所产生的强电解质和高盐成分。
• 对于单克隆抗体，一般来说igG1亚型标记效果最好，igG2a、igG2b、igM、igA这些类用于包被会好点。
  如果用于标记或者包被的抗原抗体有上述的干扰物质存在，建议通过超滤或透析去除；透析液选择尽量偏离蛋白等电点的PH缓冲液。比如20mM Tris-Hcl（PH8.5）或者20mM Tris-甘氨酸（PH8.5）的缓冲液用于透析，使用于大部分抗原抗体。

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