抗体-寡核苷酸偶联物的诞生，源自于科研与医疗领域对低丰度蛋白质进行更为精确且高效检测需求的日益增长。科学家们将抗体和寡核苷酸通过特定方式偶联合成的新型嵌合生物分子，使之兼具抗体和核酸的双重特性。
抗体-寡核苷酸偶联物通过将抗体与寡核苷酸进行偶联，形成具有双重功能的生物分子。抗体部分负责精准识别并结合目标抗原，而寡核苷酸部分则携带特定的检测信息，以实现特定的生物学效应。
实验流程
首先，将适量的寡核苷酸活化剂与抗体活化剂分别加入到对应的寡核苷酸和抗体溶液中，进行孵育处理以激活两者的功能基团。随后，利用纯化柱对活化后的寡核苷酸进行提纯，以去除未反应的杂质及副产物；同时，采用脱盐柱对抗体进行脱盐处理，以优化其纯度与稳定性。完成上述纯化与脱盐步骤后，得到的是功能基团已被成功活化的寡核苷酸和抗体。接下来，将这两种活化的生物分子按照预定的摩尔比例混合，并在适宜条件下进行长时间的孵育反应，以确保寡核苷酸能够稳定且高效地偶联到抗体上。
检测领域的应用
抗体与寡核苷酸偶联物的结合，在PCR技术的辅助下，极大地增强了免疫信号的敏感性，为这一创新平台在生物医药检测领域的广泛应用开辟了新纪元。以下是该技术的几个核心应用领域：
（1）免疫pcr（iPCR）：iPCR是在经典的酶联免疫吸附试验（ELISA）基础上的一次革命性飞跃，它巧妙地利用PCR扩增技术替代了ELISA中的酶催化显色步骤。通过将AOCs上的DNA分子标签作为信号放大器，iPCR实现了抗体检测灵敏度的显著提升，相比传统ELISA方法，其灵敏度至少可提升1000倍。
（2）邻位连接技术（PLA）：PLA技术充分利用了AOCs的空间定位能力，通过Ab-oligo偶联物精确识别并结合到同一蛋白质分子上邻近（约30-40纳米范围内）的不同表位，或捕获形成复合物的两种蛋白质。在细胞及组织样本经过特定固定处理后，该技术能够实现对单个蛋白质及蛋白质间相互作用的精确定位、可视化呈现及定量分析，为复杂生物过程的深入研究提供了有力工具。
（3）多重免疫检测技术：该技术进一步拓展了AOCs的应用范围，通过DNA互补链间的特异性相互作用，实现了多种目标分析物在单一检测体系中的高效并行分析。具体而言，该技术将多种AOCs与固体支持物上的不同目标分析物相结合，利用PCR扩增或类似技术放大信号，从而在一次实验中同时测定多个样本中的多种蛋白质，极大地提高了检测效率和数据通量，满足了高通量筛选和临床诊断的迫切需求。
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