ADA兔多克隆抗体制备方案

阶段一（M1）：F(ab’)2动物免疫与筛选方法的建立与验证

1、目标：
完成动物免疫；建立可行的筛选方法；完成兔子的血清效价评估，做出GO/NO-go决定。

2、材料准备:
由钟鼎生物进行酶切纯化制备 F(ab’)2

3、内容：
动物免疫：20只新西兰兔，免疫4次
ELISA测定血清效价评估：
抗F(ab’)2血清的收集（20*40 ml=800 ml）

4、技术要求：
(1) 免疫后血清效价大于10万倍稀释度（间接ELISA）
(2) 制备800 ml效价达标兔血清

5、周期：2-3个月

6、交付内容：M1阶段性报告包含免疫流程、血清提取及效价检测数据。

阶段二（M2）：抗CDR区ADA多克隆抗体的亲和纯化

1、目标：抗原亲和纯化获得大于10 mg抗CDR区ADA多克隆抗体

2、材料：同型对照IgG

3、内容：
（1）先利用抗血清40 ml进行抗原亲和纯化小试确定抗体得率；最终全部血清进行抗原亲和纯化；
（2）同型对照IgG亲和吸附；
（3）纯化抗体生物学特性分析：SDS-PAGE分析抗体纯度、BCA检测抗体浓度及总产量、间接ELISA检测抗体效价。

4、技术要求：
抗体纯度＞90%；抗体效价＞10万倍稀释度；特异性识别CDR区；与同型对照IgG交叉反应＜2%

5、时程：1-2周

6、交付内容：M2报告
抗原亲和纯化获得大于10 mg抗CDR区ADA多克隆抗体
抗体发货COA文件

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